ГОСТ Р ИСО 16000-4—2007
изводимые высоты или площади хроматографических пиков. Строят градуировочный график
зависимости отклика (высоты или площади хроматографического пика) от массовой концентрации
аналита (мкг/мл).
7.3 Анализ методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
СобираютВЭЖХ-системуикалибруют всоответствиис7.2. Рабочие параметрысистемы приведе
ны ниже.
Колонка с октадецилсиланом (длиной 100 мм и внутренним диаметром 5 мм и размером частиц
10 мкм) с подвижной фазой метамол/вода [смесь 70 % к 30 % (объемная доля)] должны обеспечивать
достаточное разрешение ДНФГ-формальдегида и возможных мешающих веществ. При анализе
может быть применена либо градиентная программа, либо изократическое элюирование.
Альтернативой в соответствии с ИСО 16000-3 является изократическая подвижная фаза, состоя
щая на 60 % из ацетонитрила ина40 % из воды (объемнаядоля). Рабочие параметры должны быть сле
дующими:
- колонка: С-18 с обращенной фазой;
- подвижная фаза: 60% ацетонитрила/40% воды;
- детектор: УФ. длина волны 360 нм;
- объемный расход: 1мл/мин;
- время удерживания: приблизительно 7 мин для формальдегида, 13 мин для формальдегида на
двух колонкахС1в;
- объем вводимой пробы: 25 мкл.
Перед каждым анализом проверяют базовую линию детектора для обеспечения стабильных ус
ловий.
При подготовке подвижной фазы для ВЭЖХ смешивают600 мл ацетонитрила и400 мл воды, либо
устанавливаютсоответствующие параметры ВЭЖХ с градиентным элюированием. Полученную смесь
фильтруютчерез мембранный фильтр из полиэфира с размером пор 0,22 мкм в устройстве фильтрова
ния под вакуумом, выполненным полностью из стекла или фторопласта. Дегазируют отфильтрованную
подвижнуюфазус помощьюпродувки гелиемот 10до 15 мин (100мл/мин) или нагреваниядо60 °Сот 5 до
10 мин в лабораторной конической колбе, покрытой часовым стеклом. Для предотвращения дальней
шейдегазацииподвижнойфазы последетектора устанавливаютпостоянный ограничительпротиводав
ления (350 кПа) или короткую трубку(от 15до 30 см)изфторопласта внутренним диаметром 0.25 мм.
Помещают подвижную фазу в резервуар для элюента и настраивают насос на расход 1.0 мл/мин.
Передпервыманализомнасосдолженработатьот20до 30 мин.Детектор включают, покрайнеймере, за
30мин до проведенияпервогоанализа.Регистрируютвыходнойсигналдетекторас помощьюэлектроиз
мерительных самопишущих приборовили аналогичным устройством вывода.
Для систем с ручным вводом проб набирают в чистый шприц, по крайней мере, 100 мкл пробы.
Заполняют петлю крана-дозатора подвижнойфазой(кранв положении «отбор пробы»),добавляя пробу
шприцем вдополнительный узел вводапробы. Для начала работы переводяткран-дозаторвположение
«ввод ».Одновременносвводомактивируютсистемуобработкиданных иотмечаютточкуввода надиаг
раммной ленте электроизмерительного самопишущего прибора. Приблизительно через 1 мин перево
дят кран-дозатор в положение «отбор пробы» и ополаскивают или промывают шприц и дозирующую
петлю смесью ацетонитрил — вода для подготовки к анализу следующей пробы.
Не допускается вводэлюента в петлю крана-дозатора, если кран находится в положении «ввод».
После элюирования производного ДНФГ-формальдегида прекращают регистрацию данных и
вычисляют массовую концентрацию компонента. Система может быть использована для дальнейшего
анализа проб в соответствии с процедурой, описанной выше, после того, какбудетдостигнуто устойчи
вое положениебазовой линии.
П р и м е ч а н и е — После нескольких анализов загрязнение колонки (о чем свидетельствует, например,
увеличение давления при каждом последующем вводе пробы при заданном потоке и составе растворителя) может
быть устранено промыванием ее 100 %-ным ацетонитрилом объемом, превосходящим объем колонки в несколько
раз. Подобную защиту можно обеспечить, используя форхолонки.
Если значение массовой концентрации аналита выходит за пределы линейного участка градуиро
вочной характеристики системы, пробу разбавляют подвижной фазой или вводят в хроматограф мень
ший объем пробы. Если время удерживания, полученное при предыдущих вводах пробы, не
воспроизводится (предельно допустимое отклонение ± 10 %), то соотношение ацетонитрил — вода
может быть увеличено или уменьшено для получения соответствующего времени удерживания. Если
времяудерживания слишком велико, тосоотношениеувеличивают, еслионослишком мало- соотноше-
5