ГОСТ 30417-96
Т а б л и ц а 2
Н о м ер
р а с тв о р *
О б ъ е м о с н о в н о ю
р а с т в о р а , см
О б ъ е м д о б а в л я е м о ю ^
э т и л о в о ю с п и р т а , см
К о н и с ш р а и и я
п о л у ч е н н о го р а с т в о р а а -
т о к о ф е р о л а (С |). м г /с м 3
1
2
3
4
5
6
1.0
0,8
0.6
0.4
0.2
0.1
19,0
19.2
19.4
19,6
19.8
19,9
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0.005
Градуировочный график строят в координатах: оптическая плотность (Д) —концентрация
а-токоферола в анализируемом растворе с2, мг/см3, вычисляемая по формуле
где с, —концентрация а-гокоферола в соответствующем стандартном растворе, мг/см’;
Г, —объем стандартного раствора, взятий
для
реакции.
1
c
m
j;
6 — объем анализируемого раствора, см5.
Градуировочный график строится для каждого спектрофотометра (фотоэлектроколориметра)
и проверяется при смене партий реактивов путем измерения оптической плотности стандартных
растворов двух разных концентраций.
5.4 Проведение измерения
5.4.1 Выделение неомыляемых веществ
В конической колбе взвешивают (3±0,2) г растительного масла. Результат записывают до
четвертого десятичного знака. Добавляют (0.2±0,05) г аскорбиновой кислоты и 30 см5свежеприго
товленного спиртового раствора КОН концентрацией с (КОН) = 2 моль/дм’. Смесь нагревают
с обратным холодильником на кипящей водяной бане в течение 15мин. начиная с момента закипания
раствора в колбе.
Содержимое колбы охлаждают и количественно переносят в делительную воронку тремя
порциями дистиллированной воды общим объемом 1(H) см5. Неомыленныс вещества экстрагируют
этиловым эфиром, тремя порциями по 60 см5. Объединенный эфирный экстракт промывают в
делительной воронке дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод по фенол
фталеину.
Промытую эфирную вытяжку помешают в сухую колбу, воронку ополаскивают 20 см3эфира
и сливают в ту же колбу. Засыпают 5—10 г безводного сернокислого натрия и оставляют в темпом
месте на 30 мин, периодически взбалтывая. Затем содержимое колбы фильтруют через бумажный
фильтр. Колбу и фильтр промывают этиловым эфиром, тремя порциями по 10 см3.
Эфир из объединенного фильтрата отгоняют на кипящей водяной бане до объема 1—2 см!.
Остаток эфира отгоняют под вакуумом при температуре не выше 30 ’С до объема 0,5—0,6 см3.
5.4.2 Выделение витамина Е с помощью тонкослойных хроматографических пластинок
На пластинки «Силуфол» пипеткой наносят количественно (дважды обмывая колбу порциями
эфира по 0.5 см3) весь раствор неомыляемых веществ в виде полосы длиной около 10 см, отстоящей на
2 см от нижнего и боковых краев пластинки. После каждого нанесения полосы следует дать эфиру
улетучиться.
На одном уровне с пробой на расстоянии 1см от боковых краев пластинки наносят по капле
раствор 1(см. таблицу 2) концентрацией а-токоферола 0.05 мг/см5в качестве «свидетеля*.
Пластинку «Силуфол» помещают в хроматографическую камеру. В качестве подвижной фазы
используют смесь этилового эфира и гексана 1:1. Развитие хроматограммы должно проходить в
темноте и заканчиваться при подъеме растворителя до верхнего края пластинки. Пластинку выни
мают из камеры, подсушивают на воздухе, затем края пластинки, содержащие «свидетель*, опрыс
кивают реактивом Эммерн-Эигеля. предварительно часть пластинки с пробой прикрывая
стеклянной пластинкой. Затем пластинку «Силуфол* помещают в темноту на 3 мин, после чего
пятна, содержащие а-токоферол, окрашиваются в розовый цвет. Прочерчивают две линии, выше и
ниже окрашенных пятен на 2 мм.
Слой силикагеля, заключенный междулиниями, соскабливают в бумажный фильтр диаметром
1076