ГОСТ Р 51240-98
5.6 С у с п е н з и я ф е р м е н т а ФГИ
Раствор фосфоглюкозаизомеразы массовой концентрацией 0,002 г/см3, удельной активностью
не менее 700 Е/см3, содержащий фруктозо-6-фосфат в качестве субстрата, суспендируют в растворе
сернокислого аммония по ГОСТ 3769 молярной концентрации с ((NH,,)2S04) = 3,2
моль/дм5. Суспензия устойчива при температуре 4 *С 12 мес.
6 Аппаратура
Обычная лабораторная аппаратура, а также указанная в 6.1—6.4.
6.1 Дозаторы пипеточные |3| объемами доз 100, 50 и 25 см3 и относительной погрешностью
дозирования rl % или пипетки градуированные номинальной вместимостью 2,0: 1.0; 0,5; 0,2; 0,1 и
0.02 см3 и допускаемой относительной погрешностью ±1 %.
6.2 Кюветы фотометрические из оптического стекла или пластмассы толщиной поглощающе
го слоя 1см для измерений при длинах волн 334. 340 или 365 нм.
6.3 Шпатели пластиковые или палочки стеклянные оплааленые длиной от 10 до 15 см для
перемешивания содержимого кюветы при проведении фотометрических измерений.
6.4 Спектрофотометр или фотометр фотоэлектрический для измерений при длинах волн 334.
340 или 365 нм, допускаемой абсолютной погрешностью измерений коэффициента пропускания
±1
%.
6.5 Весы лабораторные общего назначения наибольшим пределом взвешивания 20 г и допус
каемой погрешностью ±0.0001 г.
7 Проведение испытания
7.1 П о д г о т о в к а пробы к и с п ы т а н и ю
Как правило, пробы не нуждаются в особых методах подготовки к испытаниям. Результаты
испытаний по настоящей методике выражают в граммах на кубический дециметр.
Испытания концентрированных продуктов проводят после их разбавления дистиллированной
водой до получения значения относительной плотности разбавленного продукта согласно рецепту
рам натурального сока, нектара или сокосодержашего напитка. При этом относительную плотность
разбаатенной пробы выражают в граммах на кубический дециметр.
Результаты испытаний концентрированного продукта могут быть также выражены в граммах
на килограмм. При расчете результата испытаний учитывают массу пробы концентрированного
продукта и фактор разбаатения.
При испытании продуктов высокой вязкости и/или с очень большим содержанием мякоти
результаты испытаний выражают в граммах на килограмм продукта.
Продукты с мутной взвесью перед испытанием хорошо перемешивают.
Пробу разбавляют дистиллированной водой до получения значений массовых концентраций
Д-глюкозы и D-фруктозы в интервале от 0.1 до 1.0 г/дм3. Допускается использование при прове
дении испытания окрашенной разбаатенной пробы.
7.2 О п р е д е л е н и е
7.2.1 Общие требования
Определение проводят при постоянной температуре в интервале от 20 до 25 ’С. Допускается
проводить определения при постоянной температуре в интервале от 25 до 37 *С при условии
получения равноценных результатов.
Абсорбционный максимум НАДФН находится при длине волны 340 нм. При использовании
спектрофотометра переменной длины волны все измерения проводят при максимуме поглощения
света НАДФН. При использовании спектрофотометра с ртутной лампой измерения проводят при
длинах волн 334 или 365 нм.
Для дозирования буферных растворов, а также распюров проб, ферментов и коферментов
используют только градуированные пипетки или автоматические дозаторы.
7.2.2 Контрольный риствор
В фотометрическую кювету вносят 1,00 см3 раствора триэтаноламингидрохлорида по 5.2,
0.10 см3 раствора НАДФ по 5.3. 0.10 см3 раствора АТФ по 5.4 и 2,00 см3дистиллированной воды.
Раствор перемешивают пластиковым шпателем или стеклянной палочкой, выдерживают 3 мин и
измеряют оптическую плотность раствора —(Л,)* относительно оптической плотности воздуха.
1313