ГОСТ Р 51129-98
4 Сущность метода
Метод основан на ферментативном преобразовании иона цитрата в оксалоацетат с помощью ЦЛ,
затем в пируват, восстановлении их с помощью НАДН в присутствии МДГ и ЛДГ, спектрофотомет
рическом измерении израсходованного НАДН, эквивалентного количеству лимонной кислоты.
В ходе анализа при активной кислотности 7,8 pH протекают следующие ферментативные
реакции:
ЦЛ
Цитрат-ион
-------
> оксалоацетат + ацетат
(1)
Оксалоацетат + НАДН + Н‘
МДГ
L-малат + НАД*
(
2
)
Пируват + НАДН + Н
ЛДГ
L-лактат —НАД’
(
3
)
§ Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
Спектрофотометр, позволяющий проводить исследования при длине волны 340 нм или
фотометр фотоэлектрический шириной спектральной полосы не более 10 нм и допустимой абсо
лютной погрешностью измерений коэффициента пропускания не более 1%. или спектрофотометр
на ртутной лампе, позволяющий проводить измерения при длинах волн 365 или 334 нм.
Кюветы из оптического стекла или полистироловые рабочей длиной 10 мм.
Мономер или pH-метр погрешностью измерения не более 0.05 pH.
Электрод для измерения pH стеклянный.
Электрод сравнения (каломельный).
Пипетка по ГОСТ 29227 типа 3, исполнения 1, 1-го класса точности, вместимостью I и 10см3.
Дозаторы пипеточные объемом доз 1, 0,2 и 0.02 см3, относительной погрешностью дозирова
ния ± 1 % |2|.
Цилиндр по ГОСТ 1770 вместимостью 100 см3.
Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, ч. д. а., раствор концентрации с (NaOH) = 5 моль/дм3.
Цинк хлористый по ГОСТ 4529, ч. д. а., раствор массовой концентрации т (ZnCl,) =
=800 мг/дм3.
Натрий двууглекислый по ГОСТ 4201. ч. д. а.
Аммоний сернокислый по ГОСТ 3769. ч. д. а., раствор концентрации с ((NH,),S04) =
=3,2 моль/дм3.
Кислота лимонная по ГОСТ 3652, раствор массовой концентрации т (С6Н„07) = 400 мг/дм3.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Глицилглицин по НД |3J.
НАДН (динатриевая соль) по НД |3|.
Суспензия МДГ/ЛДГ по НД |3|.
ЦЛ по НД |3|.
Допускается применять другие средства
измерений с
метрологическими характеристиками,
вспомогательные
устройства с техническими характеристиками, а также реактивы
по качеству не
ниже перечисленных в настоящем разделе.
6 Отбор и подготовка проб
Отбор проб —по ГОСТ 26313. подготовка их к испытанию —по ГОСТ 26671.
6.1 П о д г о т о в к а к а н а л и з у ф р у к т о в ых и о в о щ н ы х с о к о в , н е к т а р о в
и с о к о с о д е р ж а ш н х н а п и т к о в
При высоком содержании лимонной кислоты в пробе продукта ее разводят водой до массовой
концентрации лимонной кислоты от 20 до 40 мг/дм3. Полученный раствор используют при
проведении анализа. Сильно окрашенные соки подвергают большему разбавлению. Мутные соки
перед разведением тщательно перемешивают.
6.2 П о д г о т о в к ак и с п ы т а н и юк о н ц е н т р а т о вф р у к т о в ы хи о в о щ
ных с о к о в , н е к т а р о в и с о к о с о д е р ж а щ и х н а п и т к о в
Концентрат разводят водойдо содержания сухихвеществпо рецептуре натуральногосока, нектара
или сокосодержащего напитка. При необходимости пробу разводят повторно в соответствии с 6.1.
2N4