ГОСТ Р 51469-99
6.2.2Приготовление градуированных растворов
6.2.2.1 Раствор А
В мерную колбу вместимостью 100 см1пипеткой отмеряют 10см3раствора лактозы (по 6.2.1) и
доливают дистиллированной водой до метки.
В I см3 раствора А содержится 2 мг безводной лактозы.
6.2.2.2 Раствор № I
В мерную колбу вместимостью 100 см3 пипеткой отмеряют I см3 раствора Л и доливают дис
тиллированной водой до метки.
В I см3 раствора содержится 20 мкг безводной лактозы.
6.2.2.3 Раствор № 2
Вмерную колбу вместимостью 100 см3пипеткой отмеряют 2 см3раствора А, доливают дистил
лированной водой до метки.
В 1см3 раствора содержится 40 мкг безводной лактозы.
6.2.2.4 Раствор3
В мерную колбу вместимостью 100 см3пипеткой отмеряют 3 см3раствора А, доливают дистил
лированной водой до метки.
В 1см3 раствора содержится 60 мкг безводной лактозы.
6.2.2.5 Раствор сравнения
В колбу вместимостью 100 см3вносят (0.100
1
0,001) г углекислого кислого натрия для кислот
ного казеина или (0.100
1
0,001) г трифосфата натрия —для сычужного казеина и доливают 25 см3
дистиллированной воды. Перемешивают встряхиванием и ставят на водяную баню при
температуре (65
1
5) ’С до полного растворения. Далее обработка раствора по 6.3.4.
6.3 Подготовка фильтрата в соответствии с требованиями, изложенными в приложении Л
6.3.1 Навеску массой (1.00 ± 0,01) г казенна или казеината по 6.1 помешают в коническую
колбу вместимостью 100 см3 и добавляют (кроме казеината):
- лля кислотного казеина —(0.100 ± 0.001) г углекислого кислого натрия (NaHC03);
- для сычужного казенна —(0.100
±
0.001) г трифосфата натрия (Na3H3Ol0).
6.3.2 В колбу доливают 25 см3дистиллированной воды, ставят на водяную баню температурой
от 60 до 70 ’С. Колбу периодически перемешивают встряхиванием.
6.3.3 Нагревание проводят в течение 10—15 мин до полного растворения навески.
6.3.4 Колбу охлаждают до комнатной температуры и постепенно добавляют:
- 15 см3дистиллированной воды и перемешивают встряхиванием;
- 8 см3раствора соляной кислоты или раствора серной кислоты концентрации 0.1 моль/дм3и
перемешивают встряхиванием;
- 1 см3 раствора уксусной кислоты и перемешивают встряхиванием.
Колбу оставляют на 5 мин.
Затем добавляют 1см3 раствора ацетата натрия и перемешивают встряхиванием.
Колбу оставляют до полного осаждения казеинового преципитата.
Раствор фильтруют через сухую фильтровальную бумагу.
7 Проведение определения
7.1В пробирку вместимостью 40 см3отмеряют пипеткой 2 см3фильтрата, добавляют микро
пипеткой 0.2 см3 раствора фенола массовой долей 80
%
и перемешивают встряхиванием.
Доливают концентрированную серную кислоту при помощи дозатора со скоростью 5 см3/с.
Струю кислоты направляют на поверхность раствора, а не по стенке пробирки, при этом хорошо
перемешивают.
Содержимое пробирки вновь тщательно перемешивают встряхиванием и оставляют в покое на
15 мин.
Охлаждают в течение 5 мин на водяной бане при температуре (20 ± 2) *С и приступают к изме
рению.
Измеряют оптическую плотность раствора при длине волны 490 нм с использованием раствора
сравнения, приготовленного по 6.2.2.5.
123
3