ГОСТ I» 51416-99
5.1 Диэтиловый эфир, свободный от перекисей.
5.2 Кислый углекислый натрий, раствор массовой концентрации SO г/дм1.
5.3 Спиртовый раствор 2,4-динитрофторбенэола (ДНФБ)
В 12 см’ 95 %-ного (по объему) этилового спирта растворяют 0.15 см’ ДНФБ.
Раствор готовят перед использованием.
5.4 Раствор хлористоводородной кислоты молярной концентрации 6 моль/дм3.
Один объем хлористоводородной кислоты плотностью 1,19 г/см3 смешивают с 1 объемом
дистиллированной воды.
5.5 Лимоннокислый натрий, буферный раствор pH 2,2
Последовательно растворяют в дистиллированной воде 21 г лимонной кислоты; 8 г гидроокиси
натрия; 16 см3хлористоводородной кислоты плотностью 1.19 г/см5; 0,1 см3октиловой (каприловой)
кислоты; 20 см3тиодигликоля; 3 см3 30 %-ного (по объему) водного раствора додецилового эфира
полиоксиэтилена с приблизительно 23 молекулами оксиэтилена. Объем раствора доводят до 1000 см3
дистиллированной водой.
5.6 Лимоннокислый натрий, буферный раствор pH 5.28
Последовательно растворяют в дистиллированной воде 24,5 г одноводной лимонной кислоты;
14 г гидроокиси натрия; 6.8 см* хлористоводородной кислоты плотностью 1.19 г/см3; 0.1 см3окти
ловой (каприловой) кислоты; 3 см3 30 %-ного (по объему) водного раствора додецилового эфира
полнэтоксила с приблизительно 23 молекулами оксиэтилена. Объем раствора доводят до 1000 см3
дистиллированной водой. Устанавливают pH 5.28 ± 0,02, используя хлористоводородную
кислоту плотностью 1,19 г/см* или раствор гидроокиси натрия массовой долей 50 %.
5.7 Нингидриновый реактив
5.7.1 Пропионовокислый натрий, буферный раствор pH 5,5 ± 0,1
В приблизительно 400 см3дистиллированной воды растворяют I6S г гидроокиси натрия. Ох
лаждают. затем при встряхивании добавляют 49S см3проппоповой кислоты. Объем раствора доводят
до 1000 см3дистиллированной водой.
5.7.2 Приготовление реактива
Нингидриновый реактив готовят в атмосфере азота и в темноте. В колбу вместимостью 2000 см3
помещают 1000 см3 свободного от перекисей монометнлового эфира этиленгликоля, 1000 см3 бу
ферного раствора пропионовокислого натрия и 40 г нингидрина. Встряхивают до полного раство
рения. затем добавляют 1,33 г 2-водного хлористого олова (II) (SnCI2 •2Н,0). Перемешивают
встряхиванием до полного растворения. (См. примечание).
Реактив устойчив в течение 1мес при хранении при 4 *С под небольшим давлением в атмосфере
азота и в темноте.
П р и м е ч а н и е —Если наблюдается выпадение осадка хлористого олова (II). его заменяют 7,5 см3
раствора хлористого титана массовой концентрации 150 г/дм3или 1.5 г гидринданзина на 1дм3реактива.
5.8 Лизин, стандартный раствор молярной концентрации
с
I мкмоль/дм3
В 100 см3 раствора хлористоводородной кислоты молярной концентрации
с
(НО) = 0,1 моль/дм3
растворяют 182,5 мг моногидрохлорида лизина. Отбирают точно 10 см3 этого раствора и разбав
ляют его до 100 см3 буферным раствором лимоннокислого натрия pH 2,2 (5.5). I см3 этого
раствора содержит 1 мкмоль лизина.
6 Средства контроля
Обычная лабораторная аппаратура, а также указанная в 6.1—6.8.
6.1 Колбы плоскодонные вместимостью 250 и 1000 см3, короткогорлые с притертым коничес
ким шлифом и обратные холодильники, подходящие к колбам.
6.2 Тигли с фильтрующей пористой стеклянной пластинкой Р16 (размер пор от 10 до 16 мк).
6.3 Масляная баня температурой, обеспечивающей обратную конденсацию (от 120 до 130 *С).
6.4 Ротационный испаритель.
6.5 Автоанализатор аминокислот или система для хроматографии вручную, включающая;
а) хроматографическую колонку длиной около 250 мм и внутренним диаметром 6 мм, термо-
статнруемая при 55 ’С при помощи водяной рубашки с циркулирующей водой и заполненная до
высоты 200 мм 8 %-ной сильнокислой катионобменной смолой с поперечными связями и функци
ональными сульфогруппами, размер частиц (13 ± 2) мк;
б) небольшой поршневой насос, обеспечивающий скорость потока 50 см3/ч;
в) коллектор фракций;
г) кипящую водяную баню;
д) спектрометр со спектральной областью, включающей 570 нм. с кюветами толщиной 10 мм.
2