ГОСТ 34812—2021
8 Порядок проведения испытаний
8.1 Метод физического раздражения (по морфологическим признакам и двигательной
активности)
Метод применим к личинкам нематод, скребней, трематод и цестод.
8.1.1 Отобранные личинки нематод, скребней и цестод помещают в чашку Петри или на часовое
стекло с физиологическим раствором, подготовленным в соответствии с 7.1.1, подогретым до темпера
туры от 37 °С до 40 °С, и рассматривают в стереомикроскоп при увеличении, соответствующем размеру
личинки. Живые личинки имеют слабую подвижность. Инцистированные личинки должны быть извле
чены из оболочек. Если движение личинок не наблюдается, то их следует стимулировать с помощью
укола тонкой препаровальной иглой: у жизнеспособной личинки наблюдаются видимые движения или
самопроизвольная реакция. Разовое развертывание скрученных личинок не является явным признаком
жизнеспособности. Личинка должна проявлять спонтанные движения.
Примечание — При определении жизнеспособности отобранных личинок нематод из соленой про дукции
перед исследованием их выдерживают для реанимации в термостате при температуре 37 °С втечение 2 ч.
8.1.2 Отобранные личинки нематод помещают в чашку Петри с тонким слоем физиологического
раствора, подготовленного в соответствии с 7.1.1, и направляют в термостат с температурой 37 °С на 2
ч. Личинок рассматривают под биологическим микроскопом, отмечают деструктивные изменения тела.
Изменение цвета, отслоение покровов свидетельствуют о нежизнеспособности личинок. Если ви димые
изменения отсутствуют, но и признаков жизнеспособности обнаружить не удается, применяют метод
химического воздействия в соответствии с 8.3.
8.1.3 Личинки трематод (метацеркарии) в цистах помещают на предметное или плоское стекло в
соответствии с 6.1, добавляют несколько капель воды или физиологического раствора по 7.1.1 с темпе
ратурой от 37 °С до 40 °С и накрывают сверху предметным или покровным стеклом, помещают на стол
стереомикроскопа или биологического микроскопа. Физиологического раствора или воды должно быть
добавлено столько, чтобы покровное стекло не сдавливало цисты метацеркарий.
Просмотр цист позволяет заметить медленные движения метацеркарий внутри них, если личинки
живые (чаще всего у личинок видны сокращения кишечника или выделительного пузыря, заполненного
темными гранулами). При отсутствии движений следует осторожно надавить на верхнее стекло, что бы
было видно легкое сдавливание оболочек цист. Если личинка жизнеспособна, то придавливание
стимулирует ее самостоятельные движения. Явное нарушение целостности оболочек цист, изменения
внутреннего строения личинки, распад ее содержимого, разрушение экскреторного пузыря являются
признаками гибели метацеркарий.
8.2 Метод электрического стимулирования (с использованием постоянного
электрического тока)
Метод применим только к личинкам нематод, скребней и цестод.
Личинки нематод, скребней и цестод помещают на мокрую фильтровальную бумагу или на часо
вое стекло в тонкий слой воды. К личинке необходимо прикоснуться одновременно двумя препароваль
ными иглами, к которым с помощью двух изолированных проводов подведено напряжение от источника
постоянного электрического тока от 0,5 до 1,5 В.
Жизнеспособная личинка проявляет сократительные движения, контролируемые под биологиче
ским микроскопом или видимые в стереомикроскоп, при увеличении, соответствующем размеру личинки.
8.3 Метод химического воздействия (с использованием химических раздражителей)
Метод применим к личинкам нематод и трематод.
8.3.1Личинки трематод (метацеркарии) помещают на часовое стекло в тонкий слой раствора трип
сина согласно 7.1.3 или желчи по 7.1.7. Для ускорения эксцистирования предметное (часовое) стекло
с личинками можно слегка подогреть над пламенем спиртовки или внести предварительно подогретый от
37 °С до 40 °С раствор трипсина согласно 7.1.3 или желчи по 7.1.7 либо поставить в термостат, на гретый
до температуры 37 °С на 10 мин.
6