ГОСТ ISO 16000-21—2016
Микроскопический анализ обладает преимуществом, заключающимся в том. что предполагаемый рост
плесневыхгрибков на материале может быть подтвержден обнаружением мицелия.
Пробы окрашивают раствором хлопкового голубого в молочной кислоте (см. 6.6) и оцениваютпод
микроскопом не более чем при тысячекратном увеличении. Вслучае известь-содержащих материалов
(например, штукатурки) оценка после окрашивания с использованием хлопкового голубого в молочной
кислоте практически неосуществима из-за пузырьков газа, образующихся в результате реакции молоч
ной кислоты с карбонатами. Вэтом случаеследуетиспользоватьальтернативныйкраситель(например,
анилиновый синий).
При анализе пробсповерхности или пробсыпучего материаласледуетобратить внимание, прису
тствуют ли в пробе только споры или также мицелий плесневых грибков. Наличие мицелия является
показателем роста грибков на/в материале, в то время какспоры могут попасть в пробу издругих источ
ников.
Оценка методом микроскопии обеспечивает только полуколичественные результаты. Как резуль
тат в протокол заносяттипы спори фрагментов мицелия, установленных в порядке частоты их на
хождения.
7.5 Суспендирование материала и проб-мазков
Метод суспендирования используют для гомогенизации материала, который суспендируют в
буферном растворе (см. 6.5) для отделения плесневых грибков от материала или хлопкового тампона
(см. 7.1.4). Хлопковый тампон помещают в пробирку с определенным объемом буферного раствора
(см.6.5) ипутем различных разбавленийполучаютсуспензию. Впоследствии, аликвоты суспензии пере
носятначашки Петри с агаровойсредойдля культивирования(агар DG-18.агар насолодовом экстракте
или картофельный агар сдекстрозой). как установлено в IS 016000-17.
Пробуматериала взвешивают, оцениваютиописывают сточки зрения влажностиидругихособен
ностей. Впоследствии пробуразрезают/дробятначасти размером менее 5мм.Взависимостиотматери
ала переносят от 1до 10 гпробы в стерильную мерную колбу. Вносят 50—100 мл буферного раствора.
Буферный раствор служит для поддержания такого уровня pH. при котором большинству плесневых
грибков будет нанесен минимальный ущерб. Для снижения поверхностного натяжения и образования
суспензии используют Tween 80е’. Необходимо следить, чтобы проба была полностью покрыта
буферным раствором.
Колбувстряхивают в течение 15 минут при 200 об/миндля отделения спорот материала.
П р и м е ч а н и е — Для отделения спор от проб материалов успешно используют сочетание процессов
разрушения и перемешивания. Предварительные результаты сравнительных исследований показали более высо
кое извлечение с их применением по сравнению с методом встряхивания, описанным в 7.5.
На основе исходной суспензии готовят серию разведений. Непосредственно перед этим суспен
зиювстряхиваютнамешалкедляпробирок, посхеме 3x3 сек. Добавляют 1мл суспензии к9млбуферно
гораствора (см. 6.5)стерильнойодноразовойпипеткойилистеклянной пипеткойсхлопковым фильтром.
Аналогичным образом проводятдальнейшее разбавлениедо 1:10.1:100 и 1:1000.
Числоэтапов разбавленияи коэффициенты разбавлениядолжны бытьподобраны в соответствии
сожидаемым содержаниемспор плесневыхгрибкови конкретнойцелью измерений. Могутпотребовать
ся дополнительные этапы разбавления.
Последующий посеваликвотисходной иразбавленнойсуспензии, культивированиеи дальнейший
анализ, проводят в соответствии с ISO 16000-17.
8 Обеспечение качества
Лабораториядолжна иметь оформленноедокументальноруководствопокачеству, находящеесяв
свободном доступе для сотрудников.
9 Протокол отбора проб
Маркируют пробы для их однозначной идентификации.
Заполняют протокол отбора пробдля каждой пробы передее отбором (илисразу после отбора).
Протоколдолжен содержать, покрайней мере, следующую информацию:
а) ссылкуна настоящийстандарт:
7