ГОСТ 33822—2016
Оптический стандарт мутности, эквивалентный 10 международным единицам.
Раствор натрия хлорида 0.9 %-ный изотонический с pH (7.0
1
0.2) ед. pH.
Воду дистиллированную по ГОСТ 6709.
Агар мясо-пептонный (МПА) по ГОСТ 29112.
Бульон мясо-пептонный (МПБ) по ГОСТ 20730.
Бульон мясо-пептонный печеночный под вазелиновым маслом (МППБ) (Среда Китт-Тароци).
Сыворотка крови крупного рогатого скота.
Глюкоза по ГОСТ 975.
Натрия хлорид по ГОСТ 4233.
Морские свинки массой 350—400 г.
Кролики массой 2,0—2.5 кг.
Вирулентный штамм листерий.
6.3 Определение внешнего вида
Для определения внешнеговида все флаконы(ампулы) с вакциной из выборки по5.4 просматрива
ют визуально. Наличие механической примеси идругих посторонних включений проверяют вресуслен-
зированной вакцине по 6.4.1. Флаконы (ампулы) с ресуспензированной вакциной встряхивают и
просматривают впроходящем свете. Одновременно проверяют прочность укупорки флаконов, целост
ность флаконов (ампул), правильность маркировки.
6.4 Определение времени ресуспензирования
6.4.1 Проведение испытания
Для испытания используют трифлакона (ампулы) с вакциной. Вкаждыйфлакон (ампулу)добавля
ют дистиллированную воду, в объеме, равном объему вакцины до высушивания, и встряхивают до
полного ресуспензирования содержимого, фиксируя время с помощью часов по ГОСТ 23350.
6.4.2 Обработка результатов
Содержимое флаконов (ампул) должно ресуспензироваться втечение неболее 5 мин с образова
нием гомогенной взвеси без осадка.
6.5 Определение массовой доли влаги
Массовую долю влаги определяют согласно ГОСТ 24061.
6.6 Определение наличия контаминации посторонней микробной и грибной микрофлорой
Наличие контаминации вакцины посторонней микрофлорой проверяют согласно ГОСТ 28085.
6.7 Типичность роста
6.7.1 Типичность роста вакцинного штамма проверяют на МПА и МПБ. и МППБ. Одновременно
проводят микроскопию мазков из суспензии вакцины, окрашенных по Граму. по методике, описанной в
ГОСТ ISO 7218.
6.7.2 Обработка результатов
При посевах на МПА через 24—48 ч вакцинный штамм должен расти с образованием мелких полу
прозрачных голубых колоний S-формы; на МПБдолжно быть равномерное помутнение с последующим
образованием осадка; на МППБ под вазелиновым маслом — равномерное помутнениебез газообразо
вания. Вмазкахдолжны быть мелкие, прямыеили слегка изогнутые полиморфныепалочки, окрашенные
грамположительно.
6.8 Определение концентрации живых листерий
6.8.1 Подготовка к испытанию
Вакцинувтрех флаконах (ампулах)разводятдообъема вакцины довысушивания иготовят десяти
кратные разведения от 10"1до 10~9.Для ресуспензирования и приготовления разведений используют
МПБ с pH от 7,2 до 7.4 ед. pH, содержащий по объему 0,5 %— 1,0 % глюкозы. В среду добавляют 15
%—20 % сыворотки крови крупного рогатого скота, инактивированной при температуре 58 °С—60 °С в
течение 30 мин. Пробы вакцины перед приготовлением разведений выдерживают в течение 20—
30 мин при температуре (20 ♦.2) "С.
6.8.2 Проведение испытания
Для испытания используют два разведения вакцины; 10~ви 10-®. Из каждого разведения проводят
посевы по 0,1 см3 на поверхность пяти чашек Петри с МПА. Посевы инкубируют при температуре (36
♦. 1) °С втечение 72 ч, послечего подсчитывают количество выросших колоний вчашках по каждому
разведению. Чашки с зонами сплошного роста культуры учету не подлежат.
6