ГОСТ 33822—2016
6.8.3 Обработка результатов
6.8.3.1Определяют среднеарифметические числа колоний, выросших на чашках Петри по фор
мулам (1) и(2>
где Р, — число колоний во всех чашках из разведения 10’®;
д, — число чашек с разведением 10-8;
Х2=Х
(
2
)
92
где Р2 — число колоний во всех чашках из разведения 10~9;
д2 — число чашек с разведением 10~9.
Концентрацию живых бактерий в 1 см3 вакцины, млрд, определяют по формуле (3)
X
= —— 10 -10 - 1Q8^
2
где X,, Х2 — среднеарифметические числа колоний, выросших на чашках из разведений 10’8 и 10~9;
10 (в числителе) — пересчет на разведение 10 е:
10 — коэффициент пересчета на 1 см3;
108 — степень разведения.
6.8.3.2 Числодоз вакцины в 1см3устанавливают путем деления концентрации живых листерий в
1 см3 на 7.5 млрд (иммунизирующая доза).
6.8.3.3 Числодоз вакцины вофлаконе (ампуле)устанавливают путем умножения показателя чис
ла доз вакцины в 1.0 см3 на объем вакцины во флаконе (ампуле).
6.9 Определение безвредности
6.9.1 Общие принципы определения безвредности по ГОСТ 31926.
6.9.2 Подготовка к испытанию
Для испытания готовят объединенную пробу из трех флаконов (ампул) с вакциной. Содержимое
каждого флакона (ампулы) ресуспензируют в стерильном 0,9 %-ном растворе натрия хлорида, объем
которого соответствует объему вакцины до высушивания. Затем суспензию вакцины переносят в один
стерильный флакон и разводят стерильным 0,9 %-ным раствором натрия хлорида до концентрации
10 млрд живых листерий в 1 см3, исходя из полученной по 6.8 концентрации живых листерий в 1 см3.
6.9.3 Проведение испытания
Подготовленную по 6.9.2 пробу вакцины вводят внутримышечно вобласти внутренней поверхнос
ти бедра трем кроликам вдозе 20 млрд живых листерий вобъеме 2.0 см3. Все животные находятся под
наблюдением в течение 10 сут.
6.9.4 Обработка результатов
Вакцину считают безвредной, если все животные остаются живыми и клинически здоровыми в
течение срока наблюдения.
6.10 Определение иммуногенной активности
6.10.1 Подготовка к испытанию
6.10.1.1 Подготовка вакцины
Вакцину, приготовленную по 6.9.2. разводят всоотношении 1:1 стерильным 0.9 %-ным раствором
натрия хлорида до содержания 5 млрд/см3живых листерий.
6.10.1.2 Подготовка вирулентного штамма листерий для заражения морских свинок
Определение ЛД50 вирулентного штамма проводят один раз в шесть месяцев.
П р и м е ч а н и е — ЛДЮ — доза вирулентного штамма, вызывающая гибель половины животных испытуе
мой группы.
Морских свинок заражают внутрибрюшинно дозами 0,5; 1.0; 2.0; 3,0: 4.0; 5.0 млрд/см3микробных
клеток пооптическому стандарту мутности вобъеме 2.0 см3. Каждойдозой заражают почетыре морские
свинки. Срок наблюдения за зараженными животными 10 сут. Дозой для заражения считаютдозу, при
введении которой погибли две морские свинки.
7