ГОСТ 33644—2015
3.5.3 Стоковые растворы минеральных питательных веществ
Готовят следующие растворы с использованием химически чистых реактивов:
а) Дигидроортофосфат калия. КН2Р048,50 г
Гидроортофосфат калия, К2НР04 21.75г
Гидроортофосфат натрия дигидрат. Na2HP04.2H2033.30 г
Хлорид аммония, NH4CI 0,50г
Растворяют и доводят до 1л дистиллированной водой.
б) Хлорид кальция. СаС1227.50 г
Растворяют и доводят до 1л дистиллированной водой.
в) Сульфат магния гептагидрат, MgS04.7H2022.50 г
Растворяют и доводят до 1 л дистиллированной водой.
г) Хлорид железа (III) гексагидрат. FeCI3.6H200,25 г
Растворяют и доводят до 1л дистиллированной водой.
Осаждение в растворе (в граммах) можно предупредить добавлением одной капли концентри
рованной HCI или 0.4 г этилендиамиитетрауксусной кислоты (ЭДТА. динатриевой соли) на литр. Если
осадок образуется в стоковом растворе, то его заменяют свежеприготовленным раствором.
3.5.4 Приготовление испытуемой среды
Добавляют 1 мл каждого из указанных выше стоковых растворов на литр предварительно обра
ботанной морской воды.
3.5.5 Инокулят
Специфический инокулят не вносят в дополнении к микроорганизмам, уже находящимся в мор
ской воде. Определяют (необязательно) количество колониеобразующих гетвротрофов в испытуемой
морской среде (и также предпочтительно в исходных пробах морской воды), например, подсчетом ко
личества микроорганизмов при посеве на морской агар. Это особенно целесообразно проводить для
проб из прибрежных или загрязненных мест. Проверяют активность гетеротрофных микроорганизмов в
морской воде, проводя испытание со стандартным веществом.
3.5.6 Подготовка колб
3.5.6.1 Перед использованием всю стеклянную посуду тщательно очищают, но не требуется, что
бы она была стерильной (например, с помощью спиртового раствора соляной кислоты), промывают и
высушивают для предотвращения загрязнения остатками от предыдущих испытаний. Перед первым
использованием колбы также очищают.
3.5.6.2 Испытуемые вещества анализируют в параллельных колбах одновременно с одной кол
бой со стандартным веществом. Проводят холостой опыт в двух повторностях без испытуемого и
стандартного вещества для определения аналитического фона. Испытуемые вещества растворяют
в испытуемой среде — их вносят в виде концентрированного стокового раствора — с получением
требуемой исходной концентрации, обычно 5—40 мг DOC/л. Стандартное вещество обычно испыты
вают в исходной концентрации, соответствующей 20 мг DOC/л. Если используются стоковые растворы
испытуемого и/или стандартного вещества, то соленость морской воды не должна существенно из
меняться.
3.5.6.3 Если предполагается проявление токсических эффектов или их невозможно исключить, то
может быть целесообразным включить в дизайн испытания опыт по оценке ингибирующего действия в
двух повторностях. В один и тот же сосуд вносят испытуемое и стандартное вещества, и концентрация
стандартного вещества обычно является такой же. как в контрольном испытании (т. е. 20 мг DOC/л), для
возможного проведения сравнения.
3.5.6.4 Вносят достаточное количество испытуемых растворов в колбы Эрленмейера (подходящее
количество — примерно до половины объема колбы) и затем закрывают каждую колбу съемной крыш
кой (например, из алюминиевой фольги), обеспечивающей газообмен между колбой и окружающим
воздухом (ватные пробки непригодны при использовании анализа DOC). Колбы помещают на качалку и
встряхивают непрорывно при низкой скорости (например, 100 оборотов в минуту) на протяжении всего
испытания. Контролируют температуру (15—20 °С с точностью до ± 2 X ) и колбы защищают от света
для предупреждения роста водорослей. Воздух не должен содержать токсичных веществ.
3.5.7 Физико-химический контрольный анализ (необязательно)
Если предполагается возможность абиотического разложения или потерь, например в результа
те гидролиза (проблема существует только для специфического анализа), испарения или адсорбции,
то проводят физико-химический контрольный анализ. Его проводят добавлением хлорида ртути (II)
4