ГОСТ 33644—2015
количество колоний гетеротрофных микроорганизмов и определяют концентрацию растворенных ни
тратов. аммония и фосфатов.
4.5.2.3 Для самой пробы морской воды предоставляют следующую информацию:
- дата отбора;
- глубина отбора;
- внешний вид пробы — мутная и т. д.:
- температура в момент отбора;
- соленость:
- растворенный органический углерод DOC;
- время между отбором и использованием в испытании.
4.5.2.4 Если содержание DOC в пробе находится на высоком уровне или если предполагается,
что BOD в холостом опыте через 28 сут. составит более 30 % показателя для стандартного вещества,
то рекомендуется подвергнуть морскую воду «старению» в течение приблизительно недели перед ис
пользованием.
4.5.2.5 «Старение» пробы проводится в аэробных условиях при температуре испытания в темноте
или при рассеянном свете. При необходимости аэробные условия поддерживают путем легкой аэра
ции. Во время «старения» содержание легкоразлагающегося органического вещества уменьшается.
В кольцевом методе [3] не было выявлено никаких различий между способностью к разложению «со
старенной» пробы и только отобранной пробы морской воды.
4.5.2.6 Перед использованием морскую воду предварительно обрабатывают для удаления круп
ных частиц, например, фильтрованием через фильтр из нейлона или фильтр из грубой бумаги (не мем
бранные или GF-C фильтры) или осаждением и декантацией. Используемую процедуру описывают.
Предварительную обработку проводят после «старения», если оно проводится.
4.5.3 Стоковые растворы минеральных питательных веществ
Готовят следующее растворы с использованием химически чистых реактивов:
а) Дигидроортофосфат калия. КН2Р048.50 г
Гидроортофосфат калия. К2НР0421.75 г
Гидроортофосфат натрия дигидрат. Na2HP04.2H20 33.30г
Хлорид аммония, NH4CI 0,50 г
Растворяют и доводят до 1 л дистиллированной водой.
б) Хлорид кальция. СаС1227.50 г
Растворяют и доводят до 1 л дистиллированной водой.
в) Сульфат магния гептагидрат. MgS04.7H2022.50 г
Растворяют и доводят до 1 л дистиллированной водой.
г) Хлорид железа (III) гексагидрат. FeCI3.6H200,25 г
Растворяют и доводят до 1 л дистиллированной водой.
Осаждение в растворе (г) можно предупредить добавлением одной капли концентрированной HCI
или 0.4 г этилендиаминтетраухсусной кислоты (ЭДТА. динатриевой соли) на литр. Если осадок образу
ется в стоковом растворе, то его заменяют свежеприготовленным раствором.
4.5.4 Приготовление испытуемой среды
Добавляют 1 мл каждого из указанных выше стоковых растворов на литр предварительно об
работанной морской воды. Испытуемую среду насыщают воздухом при температуре испытания по
средством аэрации чистым сжатым воздухом в течение примерно 20 мин. Определяют концентрацию
растворенного кислорода для контроля. Насыщенную концентрацию растворенного кислорода в зави
симости от солености и температуры определяют по номограмме (см. приложение Г).
4.5.5 Инокулят
Специфический инокулят не вносят в дополнении к микроорганизмам, уже находящимся в мор
ской воде. Определяют (необязательно) количество колониеобразующих гетеротрофов в испытуемой
морской среде (и также предпочтительно в исходных пробах морской воды), например, по количеству
микроорганизмов при посеве на морской агар. Это особенно целесообразно проводить для проб из
прибрежных или загрязненных мест. Проверяют активность гетеротрофных микроорганизмов в морской
воде, проводя испытание со стандартным веществом.
4.5.6 Подготовка испытуемых сосудов
4.5.6.1Выполняют все необходимые операции, включая «старение» и предварительную обра
ботку морской воды при выбранной температуре испытания от 15 до 20 °С. обеспечивая чистоту, но не
стерильность всей стеклянной посуды.
9