ГОСТЕЙ 14148-2015
6.3.3 Экстракция
Смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют
10
см3 смеси
этанолаи метанола
(4.2.3)
и
1.0
г карбонатакалия
(4.2.10)
и хорошо
перемешивают. Добавляют установленный объем
У
е
(30
см3) н-гексана
(4.2.5)
и
энергично встряхивают. Затем оставляют в темном месте до разделения фаз или
центрифугируют при
2000р
в течение
10
мин. Н-гексановый экстракт можно
хранить в течение ночи при температуре
4
°С в среде азота в темном месте.
6.3.4 Перенос и разбавление фазы
Переносят в виалу пипеткой аликвотный объем Уафазы н-гексана (6.3.3):
0 5 см3 для обогащенной пробы и 5,0 см3 для необогащенной пробы. Удаляют
растворитель в токе азота и снова растворяют осадок в установленном объеме
V
метанола (4.2.1) — 1,0 см3, получая раствор анализируемой пробы для анализа
методом ВЭЖХ.
6.4 Идентификация
Идентифицируютвитамин Ki,сравниваявремяудержанияпикана
хроматограммах, полученных при анализе раствора анализируемой пробы (6.3.4)
и стандартного аналитического раствора (4.5.2). Идентификацию пика также
можно выполнить, если добавлять соответствующие стандартные растворы в
небольшом количестве в раствор анализируемой пробы.
Было доказано, что разделениеи количественныйанализ являются
удовлетворительнымипри соблюденииуказанных нижеэкспериментальных
условий (см. также рисунки А.1-А.З). Альтернативные условия ВЭЖХ приведены в
таблице С.1.
Неподвижная фаза и размеры Resolve С18, 5 мкм, 150 * 3,9 мм.
колонки:
Подвижная фаза:Смешивают100 см3 дихлорметана(4.2.4),
Скорость потока:
Инжектируемый обьем:
900 см3 метанола (4.2.1) и 5 см3 раствора хло
рида-ацетата цинка (4.2.16).
1,0 см3/мин.
20 мм3.
7