TOCTEN 14148-2015
5.4 Система поелеколоночной дериватизации
Колонкаизнержавеющейсталиилистекла,помещеннаямежду
аналитической колонкой и флуориметрическим детектором, диаметром 2,0-6 Л
мм, длиной 10-150 мм, заполненная цинковым порошком (4.2.14).
5.5 Устройство для фильтрации
Подходит мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.
Примечание — Фильтрация подвижной фазы также, как и раствора пробы,
через мембранный фильтр до использования или инжектирования может увеличить срок
службы колонок.
6 Методика проведения испытания
6.1 Меры предосторожности
Витамин Ki очень чувствителен к свету. Во время проведения испытаний
следует принимать меры для защиты пробы и соответствующих растворов с
использованием лабораторной посуды из коричневого стекла.
6.2 Подготовка аналитической пробы
Гомогенизируют аналитическую пробу. Измельчают грубый материал при
помощи соответствующего измельчителя и снова перемешивают, предварительно
охлаждая, чтобы не допустить воздействия высокой температуры в течение
длительного периода.
6.3 Приготовление раствора пробы
6.3.1 Экстракция из пробы
Взвешивают 1г порошкообразной или Ю г жидкой пробы с точностью
до 0,001 г в закрывающуюся аналитическую пробирку или коническую колбу.
В порошкообразную пробу добавляют 15 см3 воды с температурой 40 °С и
перемешиваютнавортексе,в жидкуюпробудобавляют5 см3 водыс
температурой 40 °С. Проводят холостой опыт, используя только реактивы без
пробы (см. 6.5).
6.3.2 Обработка ферментом
Добавляют 5 см3фосфатного буфера с pH 7,9-8 0 (4.2.15) и перемешивают.
Добавляют 1,0 г липазы (4.2.17), перемешивают на вортексе,закрывают пробкой и
встряхивают в течение примерно 2-3 мин. Выдерживают смесь при температуре
(37 ±2) °С в течение 2 ч. Через равные промежутки времени, например 20 мин,
энергично встряхивают смесь вручную,
б