ГОСТ 33642—2015
является достаточным для личинок раннего возраста в течение первых 10 сут. Немного больше корма
требуется для личинокболее старшего возраста. 0.5-1 мг на личинку в сутки является достаточным для
остального периода испытания. Количество корма снижают во всех обработках и контроле, если отме чен
рост грибов или в контроле наблюдается гибель личинок. Если невозможно остановить рост грибов, то
испытание повторяют заново. При испытании веществ с высокой адсорбирующей способностью (на
пример. с log K„w> 5) или веществ, ковалентно связывающихся с осадком, количество корма, необхо
димое для обеспечения выживаемости и естественного роста организмов, добавляют к искусственному
осадку до периода стабилизации. Для этого используют растительный материал вместо корма для рыб,
например, добавляют 0,5 % (сухая масса) мелко измельченных листьев жгучей крапивы {Urtica dioeca),
шелковицы (Morus alba), клевера ползучего или белого (Trifolium repens), шпината (Spinacia oleracea) или
другого растительного материала (Cerophylили аотфа-целлюлоза).
9.1.7 Условия инкубации
9.1.7.1 Проводят легкое аэрирование надосадочной воды в испытуемых сосудах предпочтительно
в течение 24 ч после внесения личинок и продолжают в течение всего испытания (следует соблюдать
осторожность в отношении того, что концентрация растворенного кислорода недолжна снижаться ниже
60 % ASV). Аэрацию проводят через стеклянную пастеровскую пипетку, зафиксированную на 2-3 см
выше слоя осадка (т. е. один или несколько пузырьков в секунду). В случае испытания летучих химиче
ских веществ аэрацию системы осадок-вода не проводят.
9.1.7.2 Испытание проводят при постоянной температуре (20 "С
±
2 °С).Для С. tontas и С.yoshimatui
рекомендуются температуры соответственно (23 °С
±
2 °С) и (25 °С
±
2 ЭС). Используют 16-часовой све
товой период, и интенсивность света должна составлять от 500 до 1000 люкс.
9.1.8 Продолжительность воздействия
Воздействие начинается с внесения личинок в обогащенные и контрольные сосуды. Максималь
ная продолжительность воздействия составляет 28 сут для С. riparius и С. yoshimatui и 65 сут для С.
tentans. Если комары вылупляются раньше, то испытание можно закончить минимум через 5 сут после
вылупления последней взрослой особи в контроле.
9.2Наблюдения
9.2.1 Вылуплоние
9.2.1.1 Определяют время вылупления и общее количество полностью вылупившихся комаров
(самцов и самок). Самцов легко определить по их перистым усикам.
9.2.1.2 Испытуемые сосуды осматривают не менее трех раз в неделю для визуальной оценки лю
бого аномального поведения (например, выход из осадка, аномальное плавание) по сравнению с кон
тролем. В период предполагаемого вылупления ежедневно подсчитывают количество вылупившихся
комаров. Каждый день определяют пол и количество полностью вылупившихся комаров. После иден
тификации комаров извлекают из сосудов. Регистрируют любые кладки яиц, остающиеся до окончания
испытания, а затем их удаляют для предупреждения повторного внесения личинок в осадок. Также
регистрируют число видимых невылупившихся куколок. Руководство по определению вылупления при
водится в приложении Г.
9.2.2 Рост и выживаемость
Если должны быть представлены данные по выживаемости и росту личинок за первые 10 сут, то
в начале испытания в общее число испытуемых сосудов включают дополнительные сосуды, чтобы их
можно было использовать в дальнейшем. Осадок из этих дополнительных сосудов просеивают через
сито с размером отверстий 250 мкм. которое задерживает личинки. Показателями гибели личинок яв
ляется неподвижность и отсутствие реакции на механическое раздражение. Также подсчитывают
ко личество личинок, которых не удалось обнаружить, и их относят к мертвым (личинки, которые
погибли в начале испытания, могли подвергнуться микробному разложению). Определяют
(беззольную) сухую массу выживших личинок на испытуемый сосуд и рассчитывают среднюю
индивидуальную сухую массу на сосуд. Рекомендуется определить возраст выживших личинок; для
этого измеряют ширину головной капсулы у каждой особи.
9.3 Аналитические определения
9.3.1 Концентрация испытуемого вещества
9.3.1.1 В начале испытания анализируют как минимум пробы надосадочной воды, поровой воды
и осадка (предпочтительно через один час после внесения испытуемого вещества), а в конце испыта
ния анализу подвергают указанные пробы только при самой высокой концентрации и при одной более
6