ГОСТ 33642—2015
компонентов осадка и ресуспендирования мелких частиц во время добавления испытуемой воды в
водную колонку, осадок покрывают пластиковым диском и воду выливают на него, и после этого диск
сразу же удаляют. Подходят также другие устройства.
9.1.1.2 Испытуемые сосуды покрывают (например, стеклянными пластинками). Если необходимо,
то во время испытания уровень воды доводят до первоначального объема для компенсации потери
воды за счет испарения. Для предупреждения отложения солей используют дистиллированную или
деионизированную воду.
9.1.2 Внесение тестовых организмов
9.1.2.1 За 4-5 сут до внесения тестовых организмов в испытуемые сосуды кладки яиц отбирают
из культур и помещают в небольшие сосуды с культуральной средой. Используют выдержанную среду
из исходной культуры или свежеприготовленную среду. При использовании последней в культуральную
среду добавляют небольшое количество корма, например, зеленые водоросли и/или несколько капель
фильтрата мелко измельченной суспензии хлопьевидного корма для рыб (см. приложение А).
Исполь зуют только недавно отложенные кладки яиц. Обычно личинки начинают вылупляться через
пару суток после кладки (2-3 сут для Chironomus riparius при температуре 20 ’С и 1-4 сут для
Chironomus tentans при температуре 23 5С и Chironomus yoshimatuiпри температуре 25 °С). рост
личинок происходит в че тыре стадии развития, каждая продолжительностью 4-8 сут. В испытании
используют личинок первой стадии развития (2-3 или 1-4 сут после вылупления). Стадию развития
комаров определяют по ширине головной капсулы [6].
9.1.2.2 В каждый испытуемый сосуд, содержащий обогащенный осадок и воду, произвольно вно
сят 20 личинок первой стадии развития, используя пипетку с тупым кончиком. Аэрацию воды оста
навливают во время внесения личинок в испытуемые сосуды, и еще на 24 ч после этого (см. 9.1.2.1 и
9.1.7.1). Согласно выбранному дизайну испытания (см. 8.1.2 и 8.2.1) количество используемых личинок
на каждую концентрацию составляет не менее 60 для установления точки ЕС и не менее 80 для уста
новления NOEC.
9.1.2.3 Через 24 ч после добавления личинок испытуемое вещество вносят в надосадочную водную
колонку и вновь проводят легкую аэрацию. Небольшие объемы растворов испытуемого вещества вно
сят пипеткой ниже поверхности воды. Затем надосадочную воду осторожно перемешивают, не нарушая
осадок.
9.1.3 Испытуемые концентрации
9.1.3.1 Испытание по подбору диапазона концентраций необходимо для определения диапазона
предельных концентраций в конечном испытании. Для этой цели используют ряд широко разнесенных
концентраций испытуемого вещества. Для обеспечения одинаковой плотности хирономид на поверхно
сти, используемой для конечного испытания, хирономиды подвергают воздействию каждой концентра
ции испытуемого вещества в течение периода времени, позволяющего установить соответствующие
испытуемые концентрации, и для этого не требуется повторностей.
9.1.3.2 Испытуемые концентрации для конечного опыта определяют на основе результатов ис
пытания по подбору диапазона концентраций. Используют и выбирают не менее 5 концентраций, как
описано в 8.1.1-8.2.1.
9.1.4 Контроли
В испытание включают контрольные сосуды, не содержащие испытуемого химического вещества,
но содержащие осадок, при соответствующем количестве повторностей (см. 8.1.2-8.2.1). В том случае,
если используется растворитель для внесения испытуемого вещества (см. 7.5.1), следует добавить
контроль на растворитель с осадком.
9.1.5 Тест-систома
Используют статические системы. В исключительных случаях используются полустатические или
проточные системы с периодическим или постоянным обновлением надосадочиой воды, например
если показатели качества воды становятся непригодными для тестового организма или нарушается
химическое равновесие (например, уровни растворенного кислорода падают слишком низко, концен
трация выделенных продуктов повышается слишком высоко или минеральные вещества вымываются из
осадка и влияют на значение pH и/или жесткость воды). Однако подходят и могут быть предпочти
тельными другие методы улучшения качества надосадочиой воды, такие как аэрация.
9.1.6 Корм
Л
ичинок кормят предпочтительно каждый день или не менее трех раз в неделю. Корм для рыб
(суспензия в воде или мелко измельченный корм, например Tetra-Min или Tetra-Phyll; подробное опи
сание см. в приложении А) в количестве 0,25-0,5 мг (0,35-0,5 мг для С. yoshimatui) на личинку в сутки
5