ГОСТ 33640—2015
данной обработке). Кроме того, если наблюдаются какие-либо различия во внешнем виде (например,
поражения кожного покрова, отечные части тела) между обработанными и контрольными червями, то их
также регистрируют.
8.6.5 Сразу после подсчета/оценки живых червей, обнаруженных в каждой повторности, подвер
гают высушиванию, предварительному взвешиванию и маркировке чаш для взвешивания (по одной на
повторность), и умерщвлению с помощью капли этанола на чашу для взвешивания. Взвешенные чаши
помещают в сушильный шкаф при (100 ± 5) “С для высушивания в течение ночи, затем их взвешивают
после охлаждения в эксикаторе и определяют сухую массу червей (предпочтительно в граммах, не ме
нее четырех знаков после запятой).
8.6.6 В дополнение к общей сухой массе определяют беззольную сухую массу, как описано [49],
для учета неорганических компонентов, происходящих из потребляемого осадка, присутствующего в пи
щеварительном тракте червей.
8.6.7 Биомассу определяют как общую биомассу на каждую повторность, включая половозрелых
и молодых особей червей. Мертвых червей не учитывают для определения биомассы на каждую по
вторность.
8.7 Проверка концентрации испытуемого вещества
8.7.1 Отбор проб
8.7.1.1 Пробы для химического анализа испытуемого вещества отбирают по меньшей мере при
самой высокой и низкой концентрациях как минимум в конце фазы уравновешивания (перед добавле
нием тестовых организмов) и в конце испытания. Для анализа отбирают по меньшей мере основную
часть осадка и надосадочной воды. Как минимум две пробы отбирают в матриксе и обработке для
каждой даты отбора проб. Одну из повторностей проб сохраняют в качестве резерва (для анализа,
например, в том случае, если результаты первоначального анализа находятся за пределами диапа
зона ± 20 % номинальной концентрации). В случае специфических свойств вещества, например, если
предполагается быстрое разложение испытуемого вещества, то схему проведения анализа пересма
тривают (например, проводят более частый отбор проб, анализ нескольких уровней концентраций) на
основе экспертной оценки. Пробы можно отобрать в промежуточные интервалы времени (например, на
седьмые сутки после начала воздействия).
8.7.1.2 Надосадочную воду отбирают осторожным сцеживанием или откачиванием с минимизаци
ей возмущения осадка. Объем проб регистрируют.
8.7.1.3 После удаления надосадочной воды осадок гомогенизируют и переносят в подходящую
емкость. Массу влажной пробы осадка регистрируют.
8.7.1.4 Если дополнительно требуется провести анализ испытуемого вещества в поровой воде,
то гомогенизированные и взвешенные пробы осадка центрифугируют для получения поровой воды.
Например, примерно 200 мл влажного осадка помещают в центрифужные стаканы вместимостью
250 мл. Затем пробы центрифугируют без фильтрации для выделения поровой воды, например при
(10000 ± 600) об/мин в течение 30-60 мин при температуре, не превышающей используемую в испыта
нии. После центрифугирования супернатант сливают или с осторожностью отбирают пипеткой, чтобы
не внести никаких частиц осадка, и регистрируют объем. Массу оставшихся гранул осадка регистриру
ют. Если определяют сухую массу осадка на каждую дату отбора проб, то это облегчает оценку баланса
массы или извлечения испытуемого вещества в системе вода-осадок. В некоторых случаях невозможно
провести анализ концентрации в поровой воде, так как объем выборки слишком мал.
8.7.1.5 При отсутствии возможности провести анализ сразу же все пробы хранят подходящим спо
собом. например, в условиях хранения, рекомендованных для минимальной деградации конкретного
испытуемого вещества (например, пробы из окружающей среды обычно хранят при температуре минус
18 °С в темноте). До начала испытания получают информацию о надлежащих условиях хранения для
конкретного испытуемого вещества, например продолжительность и температура хранения, процедура
извлечения и т.д.
8.7.2 Аналитический метод
8.7.2.1Поскольку вся процедура определяется в основном достоверностью, точностью и чувстви
тельностью аналитического метода, используемого для испытуемого вещества, то экспериментальная
проверка точности и воспроизводимости химического анализа, а также извлечения испытуемого ве щества
из проб воды и осадка является достаточной для конкретного метода как минимум при самой низкой и
высокой испытуемых концентрациях. Также проверяется отсутствие испытуемого вещества в
Ю