ГОСТ 33640—2015
сведения о статистической мощности, полученные при проверке гипотез в кольцевом методе испыта
ния, приведены в приложении Д.
8.4 Условия воздействия
8.4.1 Тестовые организмы
8.4.1.1 Испытание проводится не менее чем с 10 червями для каждой повторности, которые ис
пользуются для определения биологических показателей. Данное количество червей соответствует
примерно 50-100 мг влажной биомассы. Принимая содержание сухого вещества за 17,1 % [48], полу
чается приблизительно 9-17 мг сухой биомассы на сосуд. Агентство по охране окружающей среды США
(2000 [7]) рекомендует использовать уровень загрузки, не превышающий 1:50 (сухой биомассы: ТОС).
Для искусственного осадка, описанного в 7.6.1. это соответствует примерно 43 г осадка (сухая масса)
на 10 червей при содержании ТОС на уровне 2.0% сухого осадка. Если используется более 10 червей на
сосуд, то количество осадка и иадосадочной воды следует скорректировать соответствующим об
разом.
8.4.1.2 Все черви, используемые в испытании, должны происходить из одного источника и иметь
одинаковое физиологическое состояние (см. приложение Г)- Черви отбираются одинакового размера
(см. 8.4.1.1). Дополнительные пробы партии или стоковой культуры червей рекомендуется взвешивать
перед испытанием для оценки средней массы.
8.4.1.3 Червей, используемых в испытании, извлекают из культуры (см. приложение Г). Крупные
особи (половозрелые) без признаков недавней фрагментации переносят в стеклянную посуду (напри
мер. чашки Петри), содержащую чистую воду. Затем их синхронизируют, как описано в приложении Г.
После регенерации в течение от 10 до 14 сут для испытания используют неповрежденных целых чер вей
одинакового размера, которые активно плавают или ползают после осторожного механического
воздействия. Если условия испытаний отличаются от условий культивирования (например, по темпе
ратуре. световому режиму и иадосадочной воде), то достаточной является акклиматизация, например, в
течение 24 ч при температуре, световом режиме, а также с использованием иадосадочной воды, как в
испытании, для адаптации червей к условиям испытания. Адаптированные олигохеты распределяют
произвольно в испытуемые сосуды.
8.4.2 Кормление
Поскольку корм добавляют в осадок до (или во время) внесения испытуемого вещества, то до
полнительно червей не кормят во время испытания.
8.4.3 Световой период и температура
Световой период при культивировании и испытании обычно составляет 16 ч [3]. [7]. Интенсивность
света должна поддерживаться низкой (например. 100-500 лк), имитируя природные условия на по
верхности осадка, и ее оценивают не менее одного раза в течение периода воздействия. Температура
должна составлять (20 ± 2) °С в течение всего испытания. Разность температур между испытуемыми
сосудами не должна превышать ± 1°С в указанный момент измерения. Испытуемые сосуды произволь но
помещают в термостат или место, в которых проводится испытание, например, для минимизации
изменения уровня размножения за счет расположения сосудов.
8.4.4 Аэрация
Надосадочную воду в испытуемых сосудах подвергают легкой аэрации (например. 2-4 пузырька
в секунду) через пастеровскую пипетку, зафиксированную примерно на 2 см выше слоя осадка для ми
нимизации возмущения осадка. Необходимо следить, чтобы концентрация растворенного кислорода не
снижалась ниже 30 % насыщения воздуха (ASV). Подачу воздуха контролируют и при необходимости
регулируют не менее одного раза в день по рабочим дням.
8.5 Измерения качества воды
В иадосадочной воде измеряют следующие показатели качества воды:
- температура: в начале и в конце периода воздействия не менее чем в одном испытуемом со
суде для каждой концентрации и одном испытуемом сосуде в контроле один раз в неделю; по воз
можности температура в окружающей среде (окружающего воздуха или водяной бани) дополнительно
регистрируется, например ежечасно;
- содержание растворенного кислорода: в начале и в конце периода воздействия не менее чем в
одном испытуемом сосуде для каждой концентрации и одном испытуемом сосуде в контроле один раз в
неделю; выражается в миллиграммах на литр и процентахASV (значение насыщения воздуха);
8