ГОСТ 33527—2015
8.4.2 Ежедневная подготовка капилляра к работе
Перед работой капилляр промывают последовательно по 10 мин деионизованной водой, рас
твором гидроокиси натрия по 8.1.1, деионизованной водой и рабочим буферным раствором по 8.1.5.
Затем капилляр промывают рабочим буферным раствором при заданном рабочем напряжении в те
чение 2 мин и проводят контроль стабильности градуировочной характеристики по 8.6.
Между анализами проб капилляр промывают рабочим буферным раствором в течение 5 мин.
После завершения анализа проб капилляр промывают 10 мин деионизованной водой и оставляют
концы капилляра погруженными в виалы с деионизованной водой.
Рекомендуется заменять рабочий буферный раствор в виалах через каждые пять измерений.
П р и м е ч а н и е — при анализе проб на злектрофореграмме возможно наблкэдать дрейф базовой ли
нии. появление ступеней и смещение времени миграции компонентов, что связано с возможным мешающим вли
янием матричных компонентов или примесей. В этом случае рекомендуется:
- увеличивать время промывки рабочим буферным раствором между анализами проб;
- проводить короткую промывку под напряжением рабочим буферным раствором;
- при появлении ступеней заменять свежими порциями рабочий буферный раствор в виалах на входе и
выходе капилляра;
- промывать капилляр деионизованной водой, раствором гидроокиси натрия, деионизованной водой по 2
мин и рабочим буферным раствором 5 мин.
8.4.3 Хранение капилляра
При перерывах в работе не более одной недели капилляр промывают в течение 10 мин деиони
зованной водой и оставляют концы капилляра погруженными в виалы с деионизованной водой.
При перерывах в работе на более длительный срок капилляр последовательно промывают по 5
мин деионизованной водой, раствором гидроокиси натрия по 8.1.1, деионизованной водой, раствором
соляной кислоты по 8.1.2 и деионизованной водой — 10 минут, затем высушивают и оставляют в
су хом состоянии. После сухого хранения для восстановления работоспособности капилляр
готовят к работе как новый капилляр по 8.4.1.
8.5 Установление градуировочной характеристики
Установление градуировочной характеристики проводят, используя градуировочные растворы,
приготовленные по 8.2. в соответствии с параметрами, указанными в таблице 1. Регистрируют не ме нее
двух электрофореграмм каждого градуировочного раствора, проверяют правильность автомати ческой
разметки пиков и при необходимости корректируют ее. Капилляр после каждого анализа проб
промывают по 8.4.2. На основе полученных данных строят градуировочные зависимости в соответ
ствии с процедурой построения градуировочных графиков, предусмотренной инструкцией пользова
теля программы обработки данных, и рассчитывают величины градуировочных коэффициентов кор
реляции методом наименьших квадратов и их среднеквадратичные отклонения (СКО). Построение
градуировочной зависимости считают успешным, если величины СКО не превышают 5 % и коэффи
циент корреляции — не менее 0.99.
При несоблюдении вышеуказанных требований находят причины несоответствия и устраняют
их. после чего установление градуировочной характеристики проводят повторно.
Установление градуировочной характеристики обязательно проводят заново в следующих слу
чаях:
- при замене капилляра;
• после проведения ремонта или длительного простоя системы капиллярного электрофореза:
- при замене хотя бы одного из компонентов рабочего буферного раствора;
- при изменении одного из условий проведения анализа (температуры, рабочего напряжения,
времени или давления при вводе пробы);
• при неудовлетворительных результатах контроля стабильности градуировочной характери
стики.
8.6 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят после промывки капилляра
по 8.4.2, используя в качестве контрольных образцов градуировочные растворы, содержащие опре
деляемые компоненты массовой концентрации, соответствующей границам диапазона
градуировоч ной характеристики по 8.2.
Регистрируют не менее двух электрофореграмм в тех же условиях, что и при проведении ана
лиза проб (см. таблицу 1). проводят автоматическую идентификацию компонентов, установив ширину
5