ГОСТ 33428—2015
Если в продукте ожидается высокое содержание аминокислот, то можно готовить разведения,
используяаликвоту менее 1см3экстракционного раствора плюс 2.5 см3раствора норлейцина mNlels.
Если анализируемый раствор не был использован в день приготовления, то ондолжен храниться
при температуре ниже 5 °С — не более 3 дней.
8.3 Приготовлениеанализируемыхрастворов с использованием объемного разведения
8.3.1 Приготовление анализируемыхрастворов аминокислот
Взвешивают 0.45—0.47 г лизина HCI. 0,29—0.31 г треонина. 0,36—0.38 гметионина. Навеску ами
нокислоты количественно переносятсраствором соляной кислоты (см. 6.2) в мерную колбу вместимос
тью 1000 см3, добавляют раствор соляной кислоты до объема примерно 900 см3и перемешивают на
магнитной мешалке втечение30 мин. Доводятобъемраствором кислоты дометки итщательно переме
шивают.
Разведениеполучвнмго раствора идобавление раствора норлейцина проводят по 6.4.3.2.
Если анализируемый раствор не был использован вдень приготовления, то ондолжен храниться
при температуре ниже 5 °С неболее 3 дней.
8.3.2 Приготовление анализируемыхрастворов промиксов и смеси аминокислот
Если в продуктеожидается низкоесодержание аминокислот, то примерную массунавески продук-
таmiporemix г-рассчитывают, какописано в 8.2.2.Для экстракциииспользуюттакие навески, чтобы гаран
тировать. что площади пиков всех аминокислот войдут в линейный диапазон градуировки. Навеску
количественно переносят с раствором соляной кислоты (см. 6.2) в мерную колбу вместимостью
1000см3,добавляют растворсоляной кислоты дообъема примерно900 см3иперемешиваютна магнит ной
мешалке в течение 30 мин. Доводят объем раствором кислоты до метки и тщательно
перемешивают.
Разведениеполученного раствора идобавление раствора норлейцина проводятпо 6.4.3.2.
Если в продукте ожидается высокое содержание аминокислот, то можно готовить разведения,
используя аликвоту менее 1см3экстракционного раствора плюс 2.5 си3раствора норлейцина.
Если анализируемый раствор не был использован вдень приготовления, то ондолжен храниться
при температуре ниже 5 °С — не более 3 дней.
8.4 Хроматография
Необходимый объем анализируемого раствора фильтруют через мембранный фильтр (см. 4.6) в
виалу автосэмплера и вводят в аминокислотный анализатор или систему ВЭЖХ (см. 4.10). Вводимый
объем, как правило, составляет 20—50 мм3.
Хроматографическая система должна разделять аминокислоты друг от друга и от других компо
нентов (например, аммония, аминов, пептидов или аминосахаров).
Пикианализируемых аминокислотдолжны быть разделены полностью до базовойлинии ото всех
других полученных пиков, для того чтобы избежать ошибочных результатов, вызванных наложением
пиков. Хроматографическая системадолжна обеспечиватьлинейную зависимостьвдиапазоне концен
траций градуировочных растворов.
9 Обработкарезультатов
9.1 Градуировка и контроль стабильности градуировочной характеристики
Содержание аминокислот в анализируемых пробах определяют с использованием градуировоч
ных растворов (см. 6.4.3). Для того чтобы убедиться в отсутствии дрейфа, для контроля стабильности
вводят градуировочный раствор после каждых четырех определений. Если при этом полученные
результаты определения массовойконцентрацииаминокислоты вградуировочном растворенеуклады
ваются в диапазон от 99 % до 101 %, то градуировку проводятзаново.
Определяют площади пиков градуировочных растворов и анализируемых растворов испытуемых
проб ирассчитывают массовую долю аминокислоты в пробе по9.2 или9.3.
9.2 Вычислениерезультатов при весовомразведении
Вычисляют коэффициент чувствительности F Rаа для каждой аминокислоты по формуле
.
с_
А*вс
т аа
(2)
r R аа “
Лыс -ГПЦ
1
в
•
где4Н[вс— площадь пика норлейцина в градуировочном растворе;
5