ГОСТ 33428—2015
3 Сущность метода
Пробы обрабатывают раствором соляной кислоты, разбавляютцитратным буфером идобавляют
внутреннийстандарт норлейцина. Аминокислоты разделяютнааминокислотном анализатореили высо
коэффективной жидкостной хроматографией с использованием катионообменной смолы и цитратного
буферав качестве элюента, проводятдериватизацию нингидриномили ортофталдиальдегидом (ОРА)и
детектируют с помощьюфотометрического или флуоресцентногодетектора соответственно.
4 Оборудование
4.1 Стаканы В(Н)—1(2)— 100(250.1000) ТХС по ГОСТ25336.
4.2 Колбы мерные 1(2)—50(100.1000)—2 поГОСТ 1770.
4.3 Цилиндры мерные 1(2)— 100(1000) поГОСТ 1770.
4.4 Пипетки градуированные 1(2, 3. 5)—1(1а. 2. 2а)—1—5(10) по ГОСТ29227.
4.5 Мешалка магнитная или блендер механический.
4.6 Фильтры мембранные изацетата целлюлозы или PVDF сразмеромпор 0,2 мкм.
4.7 Дилютордля объемного разведения.
Если дериватизацию проводят с нингидрином, то используют разбавление в соотношении 1:20.
Для ОРАдериватизациииспользуютболее высокий коэффициентразбавления. Необходиморегулярно
проверять коэффициент вариации CV при разведении; CVдолжен быть не менее 1%.
4.8 рН-метр
pH-метр илииономерсдиапазономизмерений активности водородныхионовотОдо14ед.рНи
проделом допускаемой абсолютнойпогрешности измеренияне более 0.05 ед. pH.
4.9 Весы неавтоматического действияспециального класса точности спределами допускае
мойпогрешности не более ± 0.0005г (100.0 ±0.5) мг по ГОСТR OIML 76-1.
4.10 Анализатор аминокислотный или другое оборудованиедля высокоэффективной жидкостной
хроматографии (ВЭЖХ). включающее:
4.10.1 колонкус подготовленой катионнобменной смолой;
4.10.2 предколонку;
4.10.3 инжекторавтоматический или ручнойс объемом ввода от 10до 100 мкдм3,
4.10.4 ВЭЖХ насосыдля буферов;
4.10.5 системупостколоночной дериватизации снингидрином или ОРА.
4.10.6 УФ-детектор канальный, установленный на 440 и 570 нм для постколоночной дериватиза-
ции с нингидрином, или детектор флуоресцентный сдлиной волны возбуждения 330 нм и длиной волны
излучения 460 нмдля постколоночнойдериватизации с ОРА;
4.10.7 систему регистрации и обработки данных.
4.11 Дозаторы лопаточные одноканальные переменного объема 10—100. 100—1000.
1000—5000 мм2по ГОСТ28311,
4.12 Пробирки однократногоприменения(типа Эппендорф) вместимостью 1.5 см3.
4.13 Ситосразмером стороны ячейки 0.25 мм.
4.14 Мельницалабораторнаяили ступка.
4.15 Колбы Км—1(2)—500-34/35 ТХС по ГОСТ25336.
5 Реактивы иматериалы
5.1 Вода бидистиллированная или эквивалентного качества (проводимость менее 10 мкс/см).
5.2 Стандарты определяемыхаминокислотс массовойдолей основного вещества не менее 99 %,
высушенные под вакуумом в эксикаторе над пятиокисью фосфора Р20 5 в течение двух дней перед
использованием.
5.2.1 Лизин HCI кристаллический.
5.2.2 Треонин кристаллический.
5.2.3 Метионин кристаллический.
5.3 Норлейцинкристаллическийдля использования вкачествевнутреннегостандарта с массовой
долейосновного веществане менее99%, высушенныйподвакуумом вэксикаторенадпятиокисьюфос
фора Р20 5 в течениедвухдней передиспользованием.
5.4 Натрия гидроокись по ГОСТ4328.
5.5 Кислота соляная по ГОСТ3118.
2