ГОСТ Р 52173-2003
6 Подготовка к проведению анализа
6.1 Приготовление растворов
6.1.1 Приготовление раствора концентрацией с (Трис-НС1)=1 моль/дм4
В мерную колбу по ГОСТ 12738 вместимостью 100 см’ помешают 12,11 г Трнс (оксиметил)
аминометана по 4.33, |12| растворяют в приблизительно 80 см’ деионизированной воды по 4.32,
111J. Концентрированной соляной кислотой по ГОСТ 3118 доводят pH раствора до 7.5, затем дово
дятдо метки деионизированной водой и перемешивают. Срок хранения в холодильнике по ГОСТ
26678 при температу ре от 4 *С до 5 *С—не более 6 мес.
6.1.2 Приготовление раствора концогтрацией с (NaCl) = 5 моль/дм’
В мерную колбу вместимостью 100 см’ помешают 29,22 г хлористого натрия по ГОСТ 4233.
растворяют в приблизительно 80 см1деионизированной воды, доводят до метки деионизированной
водой и перемешивают. Срок хранения при температуре от 4 ‘С до 5 "С —не более 6 мес.
6.1.3 Приготовление раствора концентрацией с (NaOH) = 30 %
В колбу по ГОСТ 1770 вместимостью 50 см1помешают 3 г гидроокиси натрия по ГОСТ 4328,
растворяют в 7 см’ деионизированной воды. Срок хранения при температуре от 4 *С до 5 "С —не
более 6 мес.
6.1.4 Приготовление раствора концентрацией с (ЭДТА) = 0,5 моль/дм’
В мерную колбу вместимостью 100 см’ помешают 14,62 г этиленднаминтетрауксусной кислоты
по 4.23, |8|, растворяют в приблизительно 80 см* деионизированной воды. Раствором гидроокиси
натрия, приготовленным по 6.1.3. доводят pH раствора до 8,0, деионизированной водой доводят до
метки и перемешивают.
Срок хранения при температуре от 4 *Сдо 5 *С —не более 6 мес.
6.1.5 Приготовление лизирующего буфера
В мерную колбу по ГОСТ 1770 вместимостью 25см3 помешают 0,5 гбромида гексадепилтриме-
тиламмония. растворяют в 10 см3деионизированной воды, добавляют автоматическим микродоза
тором 2,5 см4 раствора Трис-HCI, приготоазенного по 6.1.1, 7 см4 раствора хлористого натрия,
приготоазенного по 6.1.2, 1см’ раствора ЭДТА. приготовленного по 6.1.4, доводят деионизирован
ной водой до метки, перемешивают.
Срок хранения при температуре от 4 "Сдо 5 *С—не более 6 мес. В случае выпадения осадка при
хранении раствор выдержншиот при комнатной температуре или подогревают в термостате по 4.8.
|6) при температуре 65 ‘С до полного растворения.
Непосредственно перед использованием в приготоазенный раствор добавляют автоматичес
ким микродозатором меркаптозтанол по 4.34. 1131 из расчета 4 мм’ на 1см’ лизирующего буфера и
перемешивают.
6.1.6 Приготоатение хлороформа, насыщенного водой
В колбу вместимостью 200 см’вносят цилиндром по ГОСТ 1770 100 см1хлороформа по ГОСТ
20015, добаатяют 20 см’ деионизированной воды по ГОСТ 6709, тщательно перемешивают и остав
ляют на 24 ч для насыщения.
Срок хранения при температуре от 4 ’С до 5 ’С —не более 6 мес.
6.1.7 Приготовление 70 %-ного раствора этилового ректификованного спирта
Вколбу вместимостью 200 см’вносят цилиндром 70 см’ 96 %-ного этилового ректификованно
го спирта по ГОСТ Р 51652, добаазяют 26 см4деионизированной воды и перемешивают.
Срок хранения при температуре от 4 *Сдо 5 ‘С —не более 6 мес.
6.1.8 Приготовление раствора концентрацией с(БСА) = 20 мкг/см’
В пробирку типа Эппендорф вместимостью 1,5 см4помешают 0,002 г сухого БСА по 4.36, 115|,
добаазяют 1см3деионизированной воды, перемешивают до полного растворения. Отбирают 10 мм4
приготоазенного раствора и переносят в пробирку типа Эппендорф вместимостью 1,5 см4, добаазя ют
1см4деионизированной воды и перемешивают.
Срок хранения в морозильной камере при температуре минус 20 "С — не более I мес.
6.1.9 Приготоатение смеси нуклеотидов концентрацией
с
= 4 ммоль/дм’
В микроцеитрифужную пробирку вместимостью 0,2 см4 вносят 96 мм’ деионизированной
воды, 1мм’АТФ (концентрацией 100 ммоль/дм4) по 4.43, |22|, I мм4 ГТФ (концентрацией
100 ммоль/дм’) по 4.43, |24|. 1 мм4ЦГФ (концентрацией 100 ммоль/дм’) по 4.43. |23|, I мм’ ТТФ
(концентрацией 100 ммоль/дм4) по 4.43, [25], смесь перемешивают.
Срок хранения при температуре минус 20 *С —не более одного года.
4