ГОСТ 33287-2015
С
С
t - среднеарифметическое значение f, и t2, мин.
С -
.
— £ 0.07 ’
(4)
где С«\ и Сю - массовые концентрации охратоксина А в контрольном растворе по первой и второй
хроматограммам соответственно, нг/см3;
СА - среднеарифметическое значений Ск\ и Сю, нг/см3.
Градуировочная зависимость признается стабильной, если выполняется условие
где С - фактическое значение массовой концентрации охратоксина А в контрольном растворе, нг/см3.
Если условие (5) не выполняется, то процедуру контроля повторяют. Результаты повторного
контроля считают окончательными, и градуировку хроматографа по 7.5 проводят заново.
7.7 Контроль холостой пробы
Испытание холостой пробы проводят перед испытанием исследуемых проб.
В колбу для упаривания помещают 15 см3 смеси хлористого метилена и уксусной кислоты по
7.2.2 и упаривают в вакууме до сухого остатка, поместив колбу в водяную баню при температуре от
40 X до 45 X .
Сухой остаток растворяют в 0.5 см3подвижной фазы по 7.2.1, выдерживают не менее 5 мин и
проводят хроматографический анализ полученного концентрата по 8.3. Если на хроматограмме
присутствуют пики, по времени удерживания близкие к пику охратоксина А. то находят и устраняют
причины загрязнения холостой пробы.
П р и м е ч а н и е - Наиболее распространенной причиной неудовлетворительного результата контроля
холостой пробы является недостаточная чистота хлористого метилена, который может быть загрязнен
примесями, имеющими близкие к охратоксмну А значения времени удерживания. Такой хлористый метилен
необходимо заменить или подвергнуть тщательной перегонке, собирая среднюю фракцию с температурой
кипения от 39 X до 40 “С.
8 Проведение испытания
8.1 Экстракция охратоксина А из пробы
В делительную воронку помещают пипеткой 5 см3пробы, добавляют 5 см3раствора хлористого
натрия по 7.2.3, приливают 5 см3 смеси хлористого метилена и уксусной кислоты по 7.2.2 и
встряхивают в течение 1 мин. После расслоения фаз нижний органический слой фильтруют через
предварительно смоченный подкисленным хлористым метиленом фильтр «красная лента» в колбу
для упаривания.
П р и м е ч а н и е - При образовании стойкой эмульсии рекомендуется центрифугировать смесь в течение
2 мин при частоте вращения 5000 об.’мин.
Повторяют экстракцию охратоксина А из верхнего слоя еще раз 5 см3смеси уксусной кислоты и
хлористого метилена по 7.2.2. Полученный экстракт фильтруют в ту же колбу для упаривания.
Фильтр промывают подкисленным хлористым метиленом объемом от 5 до 10 см3. Экстракт
упаривают до сухого остатка в вакууме, поместив колбу в водяную баню при температуре от 40 X до 45
X . Сухой остаток растворяют в 0,5 см3 подвижной фазы, получая таким образом концентрат пробы.
П р и м е ч а н и е -Н а стадии освоения метода, при смене партии экстрагента, а также при возникновении
сомнений в достоверности получаемых результатов находят коэффициент прохождения охратоксина А в
контрольной пробе в соответствии с приложением А и проверяют приемлемость полученного значения.
8.2 Проведение скрининга проб
Концентрат пробы вина, полученный по 8.1. выдерживают не менее 5 мин. и затем проводят его
хроматографический анализ по 8.3.
При отсутствии на хроматограмме пика, идентифицируемого как пик охратоксина А. делают
вывод об отсутствии охратоксина А в пробе на уровне нижней границы диапазона измерений (0.001
мг/дм3) и пробу с добавкой охратоксина А не готовят.
Если на хроматограмме пробы обнаруживают пик. идентифицируемый программным
обеспечением к хроматографу как пик охратоксина А (см. 8.3). то в анализируемую пробу вносят
(5)
6