ГОСТ 33287-2015
Т а б л и ц а 1
/
Номер
раствора
1
2
3
4
5
Объем исходного раствора по
7.3.1. см5
5.0
2.0
1.0
0.5
0.25
Номинальное значение массовой концентрации.
ht cmj
100
40
20
10
5
Содержимое колбы разбавляют до метки подвижной фазой по 7.2.1 в соответствии с таблицей 1.
Срок хранения градуировочных растворов в холодильнике при температуре от 2 JC до б С - не
более семи дней.
П р и м е ч а н и е - При необходимости, например для внесения добавки охратоксина А в пробу (см. 8.2).
допускается приготовление аналогичным способом растворов охратоксина А других концентраций.
Фактическое значение массовой концентрации охратоксина А в градуировочных растворах
вычисляют по формуле (2). исходя из значений объемов исходного раствора по таблице 1.
Перед использованием растворы выдерживают до достижения комнатной температуры.
7.4 Подготовка хроматографа
Подготовку хроматографа к измерениям проводят в соответствии с руководством (инструкцией)
по эксплуатации.
Устанавливают рабочие длины волн возбуждения и регистрации флуоресценции (см. 6.1).
Объемную скорость подачи подвижной фазы и объем дозирования пробы задают в зависимости от
типоразмеров колонки, руководствуясь указаниями изготовителя хроматографа и колонки. Например,
для хроматографической колонки, приведенной в 6.3, рекомендуются значение объемной скорости
200 мм3/мин и объем петли крана-дозатора от 10 до 20 мм3. При наличии термостата колонок
устанавливают температуру (25 ± 1) аС.
7.5 Градуировка хроматографа
Диапазон линейности градуировочной характеристики составляет от 5 до 100 нг/см3. В качестве
образцовдля градуировки хроматографа используют градуировочные растворы охратоксина А по 7.3.3.
Регистрируют по две хроматограммы каждого градуировочного раствора и, используя
программное обеспечение к хроматографу, проводят градуировку хроматографа, устанавливая
параметры градуировочной характеристики и время удерживания охратоксина А.
Рассчитывают коэффициент корреляции и отклонения рассчитанных значений массовой
концентрации охратоксина А в каждой градуировочной точке от фактического значения в
соответствии с процедурой приготовления градуировочных растворов (см. 7.3.3).
Градуировку считают приемлемой, если:
- коэффициент корреляции не менее 0.998;
- относительное отклонение рассчитанного значения массовой концентрации охратоксина А от
фактического значения не более ± 10 %.
7.6 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят ежедневно перед началом
работы.
В качестве контрольного раствора используют раствор охратоксина А в подвижной фазе,
приготовленный аналогично 7.3.3. Массовую концентрацию охратоксина А в контрольном растворе
выбирают, исходя из предполагаемого содержания охратоксина А в испытуемых пробах;
рекомендуется использование раствора охратоксина А массовой концентрации 20 нг/см3.
Регистрируют не менее двух хроматограмм контрольного раствора и идентифицируют пик
охратоксина А по времени удерживания при ширине окна идентификации 5 %, внося при
необходимости программную коррекцию времени удерживания пика, и при помощи градуировочной
характеристики рассчитывают массовую концентрацию охратоксина А для каждого ввода.
Повторяемость значений времени удерживания и значений массовой концентрации охратоксина
А проверяют по формулам
i^ ili< 0 .0 5 .(3)
7
где fi и t2~ значения времени удерживания пика охратоксина А на первой и второй хроматограммах
соответственно, мин;
5