ГОСТ 32375—2013
День 6-8 - контрольная группа
С тестовой области снова удаляется шерсть. На тестовую область наносится только
растворитель аналогичным способом и оставляется в контакте с кожей под герметичной повязкой в
течение 48 часов.
5.1.5 Провокационная экспозиция: местное нанесение
День 20-22 - тестовая и контрольная группы
С боков тестовых и контрольных животных удаляется шерсть. Пластырь, заполненный тестовым
веществом, накладывается на один бок животного и. если необходимо, пластырь, заполненный
растворителем, также может быть наложен на другой бок. Пластырь удерживается в контакте с кожей под
герметичной повязкой в течение 24 часов.
5.1.6 Наблюдения: тестовая и контрольная группы
Примерно через 21 час после удаления пластыря контрольная область очищается, коротко
остригается, бреется или, если необходимо, депилируется шерсть.
Примерно через 3 часа (через 48 часов с начала контрольного нанесения) наблюдается кожная
реакция и регистрируется в соответствии с классификацией, приведенной ниже.
Примерно через 24 часа после данного наблюдения (72 часа) проводится второе наблюдение, и
снова регистрируется реакция.
Желательна независимая оценка тестовых и контрольных групп.
Шкала Магнуссона-Клигмана для оценки реакций в провокационном тесте
0 - никаких видимых изменений;
1 - разрозненная или неоднородная эритема;
2 - умеренная и сплошная эритема;
3 - интенсивная эритема и отек.
5.1.7 Повторная обработка
Если необходимо проверить результаты, полученные на первом контроле, второй контроль, с
новой контрольной группой, должен быть проведен примерно через неделю после первого.
Повторный контроль также может быть проведен и с первой контрольной группой.
5.1.8 Клинические наблюдения
Все кожные реакции и другие наблюдения, включая соматические реакции, являющиеся
результатом индукционных и провокационных экспозиций, должны наблюдаться и регистрироваться.
Другие исследования, например, гистопатологическое. измерение толщины кожных складок, могут
быть проведены для проверки сомнительных результатов.
5.2 Тест Бюхлера
5.2.1 Количество животных
В тестовой группе используется как минимум 20 животных, в контрольной - как минимум 10.
5.2.2 Уровни доз
Концентрация исследуемого вещества для каждой индукционной экспозиции должна быть
максимально возможной, вызывающей слабое раздражение. Концентрация, используемая в
провокационной экспозиции, должна быть максимальной, не вызывающей раздражение. Подходящие
концентрации определяют в предварительном тесте с использованием 2-3 животных, если другая
информация отсутствует.
Для растворимых веществ необходимо использовать воду или не вызывающий раздражение
раствор ПАВ в качестве растворителя. Для других исследуемых веществ используют 80 %-ую смесь
этанола/воды, подходящую для индукционной экспозиции, ацетон - для провокационной пробы.
5.2.3 Индукционная экспозиция: местное нанесение
День 0 - тестовая группа
С одного бока животного удаляется (коротко остригается) шерсть. Тестовый пластырь должен
быть полностью заполнен исследуемым веществом в подходящем растворителе (выбор
растворителя должен быть обоснован, жидкие исследуемые вещества можно наносить не
разбавленными, если возможно). Исследуемое вещество накладывается на тестовую область и
удерживается в контакте с кожей герметичной повязкой или пластырем в течение 6 часов.
Тестовая система должна быть герметичной. Подходит ватный диск, круглый или квадратный,
размером примерно 4-6 см2. Для гарантии герметичности предпочтительно использовать фиксацию
подходящей повязкой. Если используется манжета, то может потребоваться дополнительная
экспозиция.
День 0 - контрольная группа
На одном боку животного удаляется (коротко остригается) шерсть. На кожу тем же путем, что и
для тестовой группы, наносится только растворитель. Тестовая система удерживается в контакте с
кожей герметичным пластырем или подходящей повязкой в течение 6 часов. Если будет показано.
3