ГОСТ 32639-2014
токсических эффектов при дозо высокого уровня. Однако, при сильном повреждении кожи в начале
исследования может возникнуть необходимость прекратить испытание, и провести новое
исследование при более низких концентрациях.
4.3.2 Испытание предельной дозы
Если испытание при одном уровне дозы, равном не менее 1000 мг/кг массы тела (но ожидаемое
воздействие на человека может указывать на необходимость дозы более высокого уровня),
используя процедуры, описанные для данного исследования, вызывает не видимые токсические
эффекты, и если токсичность является маловероятной на основании данных, полученных для
соединений близких по структуре, то полное исследование с использованием трех уровней доз не
требуется.
4.3.3 Наблюдения
По крайней мере, один раз в день должен быть проведен тщательный клинический осмотр.
Дополнительные наблюдения следует проводить ежедневно, принимая необходимые меры для
минимизации потери животных при исследовании, например, аутопсию или охлаждение животных,
найденных мертвыми, и изоляция или умерщвление слабых или умирающих животных.
4.4 Основное испытание
Животных обрабатывают исследуемым веществом не менее 6 часов в день в течение 7 дней в
неделю на протяжении 90 дней. Однако, исходя, прежде всего из практических соображений,
считается приемлемым нанесение вещества 5 дней в неделю. Животных вспомогательной группы,
предусмотренной для последующих наблюдений, выдерживают в течение последующих 28 дней
после эксперимента, чтобы выявить способность к восстановлению или стойкость токсических
эффектов.
Исследуемое вещество следует наносить равномерно на участок, составляющий примерно 10
процентов от общей площади поверхности тела. При использовании высокотоксичных веществ
поверхность участка для нанесения вещества может быть меньше, но большая часть его должна
быть покрыта тонкой и равномерной пленкой насколько это возможно.
Между нанесениями исследуемого вещества, оно должно контактировать с кожей посредством
пористой марлевой повязки и не вызывающей раздражения лентой. Участок тела, через который
воздействует исследуемое вещество, должен быть покрыт способом, позволяющим удерживать
испытуемое вещество, на которое сверху наложена марлевая повязка, и не позволяющим животным
проглотить испытываемое вещество. Можно использовать ограничители движения, чтобы животное
не смогло слизнуть вещество, но полная иммобилизация не рекомендуется.
Если наблюдаются признаки токсичности, они должны быть зарегистрированы, включая время
начала, степень и продолжительность. Наблюдения за животными должны включать: изменения кожи и
волосяного покрова, глаз и слизистых оболочек, а также органов дыхания, кровообращения,
вегетативной и центральной нервной системы, соматомоторной деятельности и модели поведения, но
не ограничиваться только этим. Измерения потребления пищи и взвешивание животных следует
проводить еженедельно. Регулярное наблюдение за животными необходимо, чтобы гарантировать,
что животное не выбыло из исследования по причине каннибализма, аутолиза тканей или дистопии.
При завершении исследования всех выживших животных не вспомогательных экспериментальных
групп умерщвляют. При обнаружении умирающих животных они должны быть удалены и
умерщвлены.
4.5 Клинические наблюдения
Все следующие исследования должны быть выполнены с использованием всех животных:
- офтальмологическийосмотрспомощьюофтальмоскопаилисоответствующего
эквивалентного оборудования должен быть проведен до начала воздействия исследуемого вещества и
по завершении исследования, предпочтительно для всех животных, но. по крайней мере, в группах с
высоким уровнем доз и контрольной группе. При обнаружении изменений в глазах все животные
должны быть обследованы.
- гематология, включая гематокрит, концентрацию гемоглобина, количество эритроцитов,
общее и дифференциальное количество лейкоцитов, а также величины потенциала свертывания,
таких как время свертывания крови, протромбиновое время, тромбопластиновое время или
количество тромбоцитов, должна быть проведена при завершении исследования.
- клинические биохимические анализы крови следует проводить при завершении исследования.
Области исследований, которые считаются подходящими для всех исследований, электролитный
баланс, углеводный метаболизм (обмен веществ), функции печени и почек. Выбор особых
исследований будет зависеть от наблюдения за механизмом действия вещества. Предполагаемые
исследования - измерения кальция, фосфора, хлора, натрия, калия, уровня глюкозы натощак (с
периодами голодания для соответствующих видов), глутаминовой пировиноградной трансаминазы
3