ГОСТ 32639-2014
4 Описание метода
4.1 Подготовка
Здоровых молодых половозрелых животных акклиматизируют к лабораторным условиям, по
крайней мере, в течение 5 дней до испытания. Перед испытанием животные распределяются на
экспериментальную и контрольную группы в произвольном порядке. Волосяной покров спинной
области туловища экспериментальных животных должны быть удалены незадолго до начала
испытания. Шерстка может быть выбрита, но бритье следует осуществить приблизительно за 24 часа до
начала испытания. Приблизительно через неделю требуются повторная стрижка или бритье. При
стрижке или бритье волосяного покрова, необходимо соблюдать осторожность, чтобы не повредить
кожу, что может повлиять на ее проницаемость, если только это не предусмотрено методикой
испытания. Для применения исследуемого вещества должно быть очищено не менее 10 процентов
площади поверхности тела. Решая какая площадь должна быть очищена и каковы должны быть
размеры участка для нанесения вещества, следует учитывать массу животного. При тестировании
твердых веществ, которые можно растереть в порошок, исследуемое вещество должно быть
достаточно увлажнено водой или подходящим растворителем, чтобы обеспечить хороший контакт с
кожей. При использовании растворителя следует учитывать влияние растворителя на проницаемость в
кожу исследуемого вещества. Жидкие исследуемые вещества обычно не разбавляют.
4.2 Животные
4.2.1 Выбор видов животных
Могут быть использованы: половозрелая крыса, кролик или морская свинка. Могут быть
использованы другие виды, но их применение требует обоснования.
Для проведения испытания следует выбрать животных со следующей массой тела:
- крысы (200 - 300 г),
- кролики (2,0 - 3.0 кг),
- морские свинки (350 - 450 г).
В случае если, субхроничесхое исследование кожной токсичности проводится перед
долгосрочным исследованием следует в обоих исследованиях использовать животных одной породы и
одного и того же происхождения.
4.2.2 Количество и пол
При испытании каждой дозы следует использовать, по крайней мере. 20 животных (10 самок и
10 самцов) со здоровой кожей. Самки должны быть нерожавшими и небеременными. Если
предполагается промежуточное умерщвление животных, их количество должно быть увеличено
на количество животных, которое планируется умертвить до завершения исследования. Кроме
того, вспомогательная группа из 20 животных (по 10 животных каждого пола) может обрабатываться
дозой высокого уровня в течение 90 дней с последующим наблюдением за обратимостью,
стойкостью изменений и появления отдельных токсических эффектов в течение, как правило, не
менее 28 дней после обработки.
4.2.3 Условия содержания и кормления
Животных следует содержать в клетках отдельно. Температура в комнате с экспериментальным
животным должна быть 22 SC (± 3 ’) для грызунов или 20 °С (± 3 °) для кроликов с относительной
влажностью 30-70 процентов. При искусственном освещении должна быть последовательность: 12
часов - сеет и 12 часов - темнота. При кормлении могут быть использованы стандартные
лабораторные диеты с неограниченным количеством питьевой воды.
4.3 Условия испытания
4.3.1 Уровни дозы
Следует использовать не менее трех уровней доз. и контрольную группу и. при необходимости,
контрольную группу с нанесением растворителя. С животными контрольной группы следует
обращаться также, как и с животными экспериментальной группы, но не обрабатывать исследуемым
веществом. Самый высокий уровень дозы должен привести к токсическим эффектам, но не вызывать
смертельных исходов, которые могут препятствовать обоснованной оценке. Самый низкий уровень
дозы не должен вызывать никаких признаков интоксикации. Там. где есть приемлемая оценка
воздействия на человека, самый низкий уровень должен превышать ее. В идеале, средний уровень (-ни)
дозы должен (-ны) вызвать минимальные видимые токсические эффекты. Если используются более
чем одна промежуточная доза, уровни дозы должны быть распределены так. чтобы можно было
произвести градацию токсических эффектов. В малых и промежуточных группах и в
контрольных группах число смертельных исходов должно быть низким, чтобы обеспечить значимую
оценку результатов.
Если при нанесении исследуемое вещество вызывает сильное раздражение кожи, его
концентрация может быть уменьшена, хотя это может привести к снижению или отсутствию других 2