ГОСТ Р 56236-2014 (ИСО 6341:2012)
Окончание таблицы В.2
Номер исходного
раствора
Наименование реактива
Массовая концен
трация реактива в
питательной среде
Успенскоао
MfJ.
Г/дм3
Массовая концен
трация реактива в
питательной среде
Тамия. Г/дм3
в
Железо сернокислое 7-водное по ГОСТ 4148
(FeSO, ■7И,0)
-
0.003
7
Железо (III) хлорид в водный гю ГОСТ 4147
(FeClj, ■6К-0)
-
■
8
Кальций азотнокислый 4-водный по ГОСТ0.144
-
4142 (Са(ЫОз)У 4 Н, 0)
Микроэлементы
Раствор N9 1
--
Раствор N9 2
--
П р и м е ч а н и я
1 Состав раствора № 1: борная кислота (Н.-ВОj)- Z86 г/дм3; хлористый марганец 4-водный (MnCL-4
HjO) — 1. 81г/дм3: сернокислый цинк 7-водный (ZnSO< 7 Н-О) — 0.222 г/дм3. Раствор N92: окись молибдена
(МоОз) — 17. 64 мг/дМ3; аммоний ваннадиевокислый {NH*VO.-,)_ 22.96 мг/дм3. Объем каждого из добавляемых
растворов №1 и N92в питательную среду составляет 1см’\
2 Питательные среды для водорослей готовят на дистиллированной воде. Растворы солей микроэлемен
тов можнодобавлять во все среды независимо от того, указано это впрописи или нет.
В.4 Условия культивирования Daphnia magna Straus (метод В)
Общие рекомендации для культивирования тест-организмов
В.4.1 Исходная плотность культуры должна быть в пределах 25-50 организмов в 1дм3.
П р и м е ч а н и е — Исходная плотность культуры должна быть на уровне культуры.используемой в опыте.
Например плотность культуры 25 тест-организмов в 1дм3можно использовать для проведения опытов с 5 тест-
организмами в 200 см* опытного раствора.
Культуру Daphnia magna Straus следует кормить одноклеточными водорослям» (Scenedesmus qvadricau-
da или ChloreHa vulgaris) из лабораторной культуры. Водоросли для корма должны быть в экспоненциальной фа
зе роста. Культивируемые для кормления Daphnia /падла Straus одноклеточные водоросли можно использовать
до тех пор. пока они не будут проявлять признаков нарушения (деградации) популяции. Кормовые водоросли
не следует хранить долгое время при комнатной температуре, т. к. это приведет к ухудшению состояния
культуры водорослей. Ее следует хранить в холодильнике в темноте или даже можно заморозить и кормить
дафний до тех пор. пока не ухудшится их состояние и снизится репродукция. Нельзя допускать передозировку
при кормлении. Культура Daphnia magna Straus должна получать 0.1-0,2 мг углерода в расчете на 1организм в
день. Для того чтобы избежать попадания среды культивирования водорослей в культуру дафний,
рекомендуется отделить во доросли от культуральной среды и перенести их в среду культивирования дафний.
При выращивании маточной культуры Daphnia magna Straus необходимо поддерживать постоянный режим
культивирования. Среду следует менять, не менее чем 2-3 раза в неделю. Переносят взрослых особей в чистый
сосуд с новой средой и отделяют вылупившиеся тест-организмы от взрослых особей. Удаляют шкурки тест-
организмов. сбрасываемые при линьке, мертвых или обесцвеченных животных, а также остатки корма.
Культивирование Daphnia magna Straus осуществляют при рассеянном дневном свете или искусствен
ном освещении с периодичностью свет — темнота соответственно 16 и 8 ч. Температуру воздуха поддерживают
в пределах (20 ± 2) °С. в воздухе не должны присутствовать токсичные для дафний пары и пыль.
В.4.2 Культивирование Daphnia magna Straus для получения покоящихся (зимних) яиц
В.4.2.1 Жизненный цикл Daphnia magna Straus (рисунок В. 1)
В природе дафнии могут размножаться как бесполым, так и половым путем.
27