ГОСТ Р 56236-2014 (ИСО 6341:2012)
Водопроводную воду отбирают из крана таким способом, чтобы избежать ео загрязнения.
Для этого воду спускают 15 мин. затем отбирают в стеклянные емкости и отстаивают в тече
ние 2 сут в открытых сосудах.
Для подготовки культивационной воды используют стеклянные аквариумы (объемом 20 — 30
л). После отстаивания воду аэрируют в течение 7 сут при помощи микрокомпрессоров, затем
помещают в аквариумы емкостью 20 — 30 л и добавляют две-три веточки макроводорослвй (см.
5.2).
Для культивирования Daphnia magna Straus допускается использовать также природную воду
из незагрязненных водоемов (например, артезианских колодцев).
Культивационная вода должна соответствовать следующим требованиям:
• pH — от 7.0 до 8.3;
•жесткость общая — 80— 250 мг /дм3по СаСОэ(от 1.6 до 5.0 °Ж);
• концентрация растворенного кислорода — не менее 6 мг Ог/дм3;
- температура — (20 ± 2)°С;
•минерализация — не выше 6.0 г/дм3.
5.3.3 Проверка физиологической чувствительности тест-организмов
Периодически (не реже одного раза в месяц), а также непосредственно перед тестировани
ем. синхронизированную культуру околосуточных тест-организмов проверяют на физиологическую
чувствительность. Для этого определяют среднюю эффективную концентрацию (24 ч ЭКЕС)
модель ного токсиканта (двухромовокислого калия) в следующей последовательности.
5.3.3.1 Готовят исходный раствор модельного токсиканта массовой концентрацией 1 г/дм3
следующим способом: в мерную колбу вместимостью 1000 см3вносят 1 г двухромовокислого калия
и растворяют в небольшом количестве дистиллированной воды (см. 5.2). затем доводят содер
жимое колбы до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.
Срок хранения исходного раствора модельного токсиканта — не более 7 сут.
5.3.3.2 Готовят анализируемые растворы модельного токсиканта (двухромовокислого калия)
заданной концентрации в следующей последовательности:
- готовят растворы двухромовокислого калия массовой концентрацией от 0.1 до 2.0 мг/дм3
следующим способом: в семь емкостей вместимостью не менее 400 см3каждая мерным цилиндром
в>юсят по 300 см3культивационной воды (5.3.2). затем добавляют исходный раствор двухромово
кислого калия массовой концентрацией 1 г/дм3(5.3.3.1) соответственно: в первую емкость — 0.03
см3, во вторую — 0.075 см3, в третью- 0,15 см3, в четвертую — 0.3 см3, в пятую — 0.45 см3.в ше
стую — 0.6 см3, в седыхую — 0,75 см3 и перемешивают. При этом в каждой емкости массовая кон
центрация приготовленного раствора модельного токсиканта (двухромовокислого калия) со
ставляет соответственно: 0,1: 0.25; 0.50:1.0: 1.5:2.0 и 2.5 мг/дм3;
- затем для каждой приготовленной концентрации модельного токсиканта (двухромовокис
лого калия) отбирают три емкости вместимостью 150 см3 каждая и вносят анализируемые рас
творы следующим способом: в каждую емкость добавляют по 100 см3 конкретного раствора мо
дельного токсиканта (двухромовокислого калия), после чего помещают в них по 10 экземпляров
околосуточных тест-организмов.
5.3.3.3 Проверку физиологической чувствительности тест-организмов проводят аналогично
тестированию анализируемых проб объектов исследования по 5.5.3. Продолжительность тести
рования — 24 ч.
Для приготовления контрольной пробы используют культивационную воду (5.3.2). при этом
используют не менее трех емкостей.
Анализируемые растворы двухромовокислого калия каждой концентрации готовят непосред
ственно перед определением физиологической чувствительности тест-организмов.
5.3.3.4 Подсчитывают число выживших тест-организмов аналогично подсчету тест-
организмов при оценке токсичности анализируемых проб по 5.5.1 и определяют значение 24 ч ЭК&
модельного токсиканта (двухромовокислого калия), при этом:
- если значение 24 ч ЭК50 данного модельного токсиканта находится в диапазоне от 0.9 до 2.5
мг/дм3,то считают, что подготовленные тест-организмы пригодны для тестирования;
- если значение 24 ч Жво данного модепыюго токсиканта не входит в указанный диапазон,
то считают, что подготовленные тест-организмы не пригодны для тестирования. Проверяют
соблюдение правильности процедуры тестирования, условия подготовки тест-организмов к те-
7