ГОСТ Р 56236—2014 (ИСО 6341:2012)
ции) за счет увеличения количества тестируемых разбавлений (концентраций) пробы и сокращения коэффи
циента между разбавлениями (концентрациями) анализируемой пробы.
5.4.3 Процедура тестирования
5.4.3.1 В каждую емкость (5.4.1 и 5.4.2) вместимостью 150 см3, вносят по 100 см3анализируе
мой пробы, затем в каждую емкость помещают по 10 шт. околосуточных тест-организмов.
5.4.3.2 Для каждой анализируемой пробы (разбавлений, концентраций) подготавливают кон
трольную пробу следующим способом: в емкости вместимостью 150 см3вносят по 100 см3воды для
разбавлений (5.3.2) и помещают по 10 шт. односуточных тест-организмов.
П р и м е ч а н и е — Плотность посадки тест-организмов — 1 шт. на 10 см’.
5.4.3.3 Емкости с пробами, подготовленными по 5.3.4.1-5.3.4.6 помещают в климатостат.
5.4.3.4 Тестирование (в зависимости от анализируемой пробы) проводят в течение 48 ч или 96
ч (см.5.1) в климатостате при температуре (20 ± 2) сС и попеременном воздействии света и темноты:
- 16 ч — при равномерном белом освещении в диапазоне от 500 до 1000 лк на расстоянии 0,35
м от поверхности проб в емкостях,
• 8ч — при отсутствии освещения.
5.4.3.5 Через каждые 24 ч тестирования подсчитывают количество выживших тест-организмов
в каждой емкости (включая контрольную).
5.4.3.6 После окончания тестирования:
- измеряют рН-метром pH в каждой емкости с анализируемой и контрольной пробами.
• измеряют оксиметром значение концентрации растворенного кислорода в каждой емкости с
анализируемой и контрольной пробами;
- визуально осматривают в каждой емкости состояние тест-организмов. Любые обнаруженные
отклонения регистрируют.
5.4.4 Результаты тестирования считают достоверными, если соблюдаются следующие условия:
a) гибель тест-организмов в контрольной пробе в конце тестирования не должна превышать
10
%;
b
) Значение 24 ч ЭК50модельного токсиканта находится в пределах, указанных в 5.3.3.4.
Если условия по перечислениям а) и Ь) не соблюдаются, то находят причины несоответ
ствия. устраняют их и тестирование повторяют с новой культурой тест организмов.
5.5 Обработка результатов
5.5.1 По результатам подсчета выживших дафний (5.5.3.5) для каждого заданного разбавления
(концентрации) анализируемой пробы по трем емкостям, в том числе и трем контрольным, рассчиты
вают среднеарифметическое значение выживших тест-организмов.
5.5.2 Определение токсичности анализируемых проб
5.5.2.1Токсичность анализируемых проб А. % определяют по гибели тест-организмов для
каждого заданного разбавления (концентрации) анализируемой пробы относительно контрольной
пробы после 48 ч (96 ч) тестирования и рассчитывают по формуле
А = х‘ю о(1)
хк
где Хк - среднеарифметическое значение количества выживших тест-организмов в контроль-
ной пробе, шт. по 5.5.1;
хан - среднеарифметическое значение количества выживших тест-организмов для каждого
заданного разбавления (концентрации) анализируемой пробы, шт. по 5.5.1.
5.5.3 Определение значения средней эффективной кратности разбавления (концентрации)
5.5.3.1По результатам, полученным по 5.5.2.1. в процентах для каждого заданного разбавле
ния (концентрации) анализируемой пробы определяют конкретное значение средней эффективной
кратности разбавления (концентрации) пробы, вызывающее 50 % -ную гибель тест-организмов
96 ч ЭКРце (96 ч ЭКР50) или 48 ч ЭКМ в зависимости от анализируемой пробы. Пример определения
48 ч ЭК$о приведен в А.2.2. (приложение А).
При необходимости определяют:
12