ГОСТ 32881— 2014
вместимостью 15 см3. Пипеточным дозатором в пробирку вносят 0.05 см3 рабочего раствора внутрен
них стандартов D, (см. 6.3.8). помещают ее в шейкер для перемешивания на
1
— 2 мин и выдерживают
в темноте при комнатной температуре в течение 10 мин. Приливают 4 см3 ацетатного буферного рас
твора (см. 6.2.3) и 20 мм3 бета-глюкоронидазы. помещают пробирку на 5 мин в шейкер, затем — на 60
мин в термостат при температуре 37 °С для гидролиза. После охлаждения добавляют в пробирку 9 см3
ацетонитрила, тщательно перемешивают и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 10 мин при
температуре 4 °С. Переливают надосадочную жидкость в новую полипропиленовую пробирку вме
стимостью 15 см3и упаривают остаток до 4 см3 в токе азота при температуре 50 °С.
Полученный экстракт очищают методом твердофазной экстракции (ТФЭ) на картридже. Перед
нанесением экстракта на картридж последовательно кондиционируют сорбент 2 см3 метанола и урав
новешивают 2 см3 раствора аскорбиновой кислоты (см. 6.2.4). Затем пропускают через картридж по
лученный экстракт (при процедуре очищения вакуум или избыточное давление не применяют). Поли
пропиленовую пробирку промывают 5 см3 раствора аскорбиновой кислоты (см. 6.2.4), которую также
наносят на картридж. Затем промывают картридж 2 см3 раствора аскорбиновой кислоты (см. 6.2.4) и 2
см3деионизованной воды. Колонку сушат в вакууме водоструйного насоса в течение 45 мин. прилива ют
1 см3 гексана и сушат еще в течение 2 мин. Элюируют анализируемые соединения с помощью 4 см3
смеси гексана и этилацетата (см. 6.2.5) в новую полипропиленовую пробирку вместимостью 15 см3.
Пробирку помещают в термостатируемый нагревательный модуль с системой отдувки растворителей и
упаривают досуха в токе азота при температуре 50 ®С.
Полученный остаток перерастворяют в 0.5 см3 смеси 0,1 моль/дм3 муравьиной кислоты и ацето
нитрила (см. 6.2.6). Экстракт фильтруют и пипеточным дозатором переносят в виалу для автосамплера
жидкостного хроматографа. Полученный раствор используют для ВЭЖХ-МС/МС анализа.
7.2.2 Обработка проб молока и молочных продуктов
Молоко, сливки, сметану, кисломолочные напитки и молочные продукты, сухие молочные продук
ты перед анализом тщательно перемешивают.
10 г сыра, творога или творожных изделий взвешивают на часовом стекле или в чашке Петри,
переносят в ступку и тщательно растирают.
100 г твердого сыра измельчают на гомогенизаторе.
Взвешивают 2.0 г гомогенизированной пробы в полипропиленовой пробирке вместимостью 15 см3.
Пипеточным дозатором в пробирку вносят 0.05 см3 раствора внутренних стандартов О,. Далее обра
ботку проб и подготовку к хроматографированию проводят по 7.2.1.
8 Порядок выполнения измерений
8.1 ВЭЖХ-МС/МС анализ
8.1.1 Для определения содержания НПВЛС проводят ВЭЖХ-МС/МС анализ в условиях, указанных
в 6.5.
8.1.2 ВЭЖХ-МС/МС анализ выполняют в виде серии измерений, включающей следующие образцы:
- образцы мобильных фаз А, и А2;
- образец, полученный в условиях подготовки проб, где вместо матрицы используют 0.5 см3деио
низованной воды:
- образец, не содержащий НПВЛС, приготовленный и проанализированный ранее в соответствии
с требованиями раздела 7. в зависимости от типа исследуемой матрицы:
- образец с аттестованным содержанием НПВЛС;
- градуировочные растворы:
- анализируемые пробы:
- образцы контроля стабильности градуировки.
Если массовая доля НПВЛС в анализируемой пробе превышает значение максимального градуи
ровочного уровня, то анализируемую пробу разводят в 10 или более раз мобильными фазами А, и А2, и
проводят повторные измерения.
8.1.3 Время удерживания НПВЛС определяют при анализе градуировочных растворов.
8.2 Контроль качества измерений
Каждая серия измерений включает в себя несколько степеней подтверждения качества из
8.2.1
мерений.
11