ГОСТ 32433—2013
2.12 лаг-фаза (lag phase): Период от начала испытания до акклиматизации и/или адаптации
микроорганизмов и возрастания степени биоразложения химического вещества или органического
материала до определяемого уровня (например. 10 % от максимального теоретического биоразложе
ния или меньше, в зависимости от точности методики измерения).
2.13 фаза разложения (degradation phase): Время от окончания периода лаг-фазы до време
ни. когда разложение достигает 90 % от максимально возможного уровня.
2.14 плато-фаза (plateau phase): Фаза, в которой достигается максимальное разложение и
кривая биоразложения выравнивается.
3 Основные положения
3.1 Принцип метода
3.1.1 Исследуемое вещество, как правило, в концентрации 20 мг С/л в качестве единственного
источника углерода и энергии, инкубируют в буферной минеральной среде, которая была инокулиро-
вана смешанной популяцией микроорганизмов. Испытания проводят в закупоренных бутылках со
свободным пространством для воздуха, которое обеспечивает запас кислорода для аэробного био
разложения. Количество С02, полученное в результате полного аэробного биоразложения исследуе
мого вещества, определяется путем измерения неорганического углерода, образованного в тестовом
сосуде сверх того, что было получено в пустых контрольных сосудах, содержащих только инокулиро-
ванную среду. Степень биоразложения выражается в виде процента от теоретического максимума
образования неорганического углерода (ТНУ). исходя из количества исследуемого вещества (в рас
чете на органический углерод), добавленного первоначально.
3.1.2 Также могут быть измерены удаление РОУ и / или степень основного биоразложения ис
следуемого вещества [20].
3.2 Информация об исследуемом веществе
Для вычисления процента биоразложения должно быть известно содержание органического
углерода (масс, процент) в исследуемом веществе, измеренное или рассчитанное из его химической
структуры. В случае летучих исследуемых веществ, для определения подходящего соотношения сво
бодного пространства и объема жидкости, необходимо измерить или рассчитать константу Генри.
Информация о токсичности исследуемого вещества для микроорганизмов полезна при выборе соот
ветствующей тестовой концентрации и для интерпретации результатов, свидетельствующих о незна
чительном биологическом разложении: рекомендуется также проводить контроль ингибирования, ес ли
не известно, что исследуемое вещество не подавляет деятельность микроорганизмов (см. пункт 4.10).
3.3 Применимость метода
Метод применим для растворимых в воде и нерастворимых веществ, для которых в свою оче
редь должна обеспечиваться хорошая дисперсия вещества. Рекомендуется использовать соотноше
ние свободного пространства к объему жидкости, равное 1:2, летучие вещества с константой Генри
до 50 Па м3моль’1могут тестироваться, если содержание вещества в свободном пространстве
сосу да не будет превышать 1 % [13]. Меньший объем свободного пространства может
использоваться при тестировании веществ, которые являются более летучими, но их биодоступность
может быть ограни чена. особенно если они плохо растворимы в воде. Исполнители должны
убедиться, что соотношение свободного пространства и объема жидкости, и концентрация
исследуемого вещества таковы, что для полного аэробного биоразложения доступно достаточное
количество кислорода (например, избе гать использования высоких концентраций субстрата и малых
объемов свободного пространства).
3.4 Референтное (стандартное) вещество
Для проверки тестовых процедур параллельно должно быть протестировано стандартное ве
щество с известной биоразлагаемостью. Для этой цели при тестировании растворимых в воде иссле
дуемых веществ могут использоваться анилин, бензоат натрия или этиленгликоль и при тестирова
нии плохо растворимых веществ - 1 - октанол [13]. Биоразложение данных веществ должно достигать
более 60 % от ТНУ в течение 14 дней.
3.5 Воспроизводимость
3.5.1При рекомендуемых условиях, в том числе при концентрации 20 мг С/л. были получены
следующие результаты:
2