ГОСТ 32433—2013
Введение
Общепризнанный метод [1], основанный на оригинальном тесте Штурма [2] для оценки биоло
гического разложения органических химических веществ путем измерения образования углекислого
газа под воздействием микроорганизмов, обычно использовался в качестве основного метода для
тестирования плохо растворимых и сильно адсорбирующихся химических веществ. Он также приме
нялся для тестирования растворимых (но но летучих) химических веществ, так как выделение углеки
слого газа, по мнению многих специалистов, является единственным однозначным доказательством
деятельности микроорганизмов. На удаление растворенного органического углерода могут влиять
различные физико-химические процессы: адсорбция, испарение, осаждение, гидролиз, а также воз
действие микроорганизмов и многие небиологические реакции, в которых происходит потребление
кислорода: в редких случаях С02 образуется вследствие абиотического разложения органических
химических веществ. В оригинальном и модифицированном тесте Штурма (1). [2] С02удаляется из
жидкой фазы в поглощающие сосуды за счет барботирования (т.е. восходящий воздух пропускают
через жидкую среду для удаления С02), а в варианте Ларсона (3). [4] С02переносится из реакционно го
сосуда в поглотители за счет пропускания воздуха, не содержащего С02, через свободное про
странство сосуда, а также его непрерывного встряхивания.
При применении стандартного модифицированного теста Штурма для ряда химических ве
ществ, неорганический углерод (НУ) накапливается в среде [9]. Концентрация НУ выше, чем 8 мг/л
была обнаружена в ходе тестирования анилина в концентрации 20 мг С/л. Таким образом, сбор С02в
щелочные ловушки не давал истинного представления о количестве С02. образованного в результате
деятельности микроорганизмов в промежуточные интервалы в течение процесса разложения. В
ре зультате. предел более 60 % от теоретического максимума образования СОг (ТИСОД который
дол жен быть получен в течение «десятидневного интервала» (10 дней с момента достижения 10 %
био разложения) для классификации исследуемого вещества, как легко биоразлагаемого, не может
вы полняться для некоторых веществ, классифицируемых таким образом при использовании
метода удаления растворенного органического углерода (РОУ).
Если процент разложения меньше, чем ожидается, неорганический углерод, возможно, накап
ливается в исследуемом растворе.
Другие недостатки методологии Штурма (громоздкость, трудоемкость, большая предрасполо
женность к погрешности и неприменимость для летучих веществ) ранее привели к необходимости
поиска техник с использованием закрытых сосудов, за исключением метода Гледхилла, в основном
газовых проточных методов [101, [111- Количество С02измерялось с помощью газовой хроматографии /
анализатора неорганического углерода в автоматически отбираемых пробах газовой фазы, но рас
творенный неорганический углерод (РНУ) в жидкой фазе не принимался во внимание. Кроме того, в
тесте использовались очень маленькие сосуды (20 мл), содержащие только 10 мл среды, что вызы
вало проблемы, например, при необходимости добавления очень малых количеств нерастворимых
веществ, и/или вследствие отсутствия или недостаточного количества микроорганизмов в инокуляте
для приемлемого разложения исследуемого вещества.
В первом методе [13] С02 измеряется в свободном пространстве после подкисления и уста
новления равновесия, а во втором [14] содержание РНУ было измерено в газовой и жидкой фазе, без
обработки: более 90 % образовавшегося НУ присутствовало в жидкой фазе. Оба метода имели пре
имущества по сравнению с тестом Штурма за счет более компактной и управляемой тестовой систе
мы. возможности исследовать летучие химические вещества и отсутствия задержки, при измерении
образовавшегося С02.
IV