ГОСТ 32371-2013
собирают для анализа. Сбор выдыхаемого воздуха может не производиться, когда существует
достаточно информации, что вещество содержится в выдыхаемом воздухе в небольшом количестве
или образуется нелетучий радиоактивный метаболит. В каждом исследовании, как правило,
используют несколько групп животных, которым наносится исследуемое вещество. Одну группу по
окончании периода экспозиции умерщвляют. Другие группы животных умерщвляют в определенные
временные интервалы после экспозиции. По окончании времени проведения наблюдений оставшихся
животных умерщвляют, их кровь собирают для анализа, место нанесения пробы также удаляют для
дальнейшего анализа, а остатки тела животного анализируют на наличие невыделенного вещества.
Образцы анализируют соответствующими способами и оценивают степень перкутанной абсорбции.
4 Описание метода проведения испытаний
4.1 Выбор экспериментальных видов
Наиболее часто используемым видом являются крысы, но могут использоваться безволосые
группы животных и виды, имеющие скорость абсорбции вещества кожей близкую к скорости
абсорбции человеческой кожей. Необходимо использовать молодые, взрослые, здоровые особи
одного пола (по умолчанию мужские) обычно используемых лабораторных видов. На начальной
стадии испытания различия в массе тела животных не должны превышать ± 20 % от средней массы.
Пример - Самцы крыс массой тела 200-250 г, предпочтительны с большей массой в
данном диапазоне.
4.1.1 Количество и пол животных
Для каждого исследования и для каждого момента умерщвления должна использоваться группа,
как минимум, из четырех животных одного пола. Каждую группу животных умерщвляют в различных
временных интервалах.
Пример - По окончании периода экспозиции (6 или 24 ч) и последующие периоды
(например. 48 и 72 ч).
Если существуют данные, демонстрирующие значительные различия в кожной токсичности у
женских и мужских особей, для исследования должны быть выбраны животные наиболее
чувствительного пола. Если таких данных не существует, тогда может использоваться любой пол.
4.1.2 Условия содержания и кормления
Температура в лабораторной комнате для животных должна составлять (22±3) °С.
Относительная влажность должна составлять как минимум 30% и не превышать 70%, за
исключением времени уборки комнаты. Оптимальное значение относительной влажности составляет
50-60 %. Освещение должно быть искусственным в последовательности12 часов - свет. 12
часов - темнота. Громкие кратковременные шумы должны быть минимизированы. При кормлении
может быть использована обычная лабораторная диета с неограниченным количеством питьевой
воды. Во время испытания, а также во время адаптации, животные должны содержаться в
индивидуальных клетках. Утечка воды или еды. которая может повлиять на результаты, должна быть
минимизирована.
4.1.3Подготовка животных
Животных помечают для индивидуальной идентификации и содержат в клетках в течение, как
минимум, пяти дней до начала испытания для адаптации к лабораторным условиям.
Вслед за периодом адаптации, приблизительно за 24 ч до начала эксперимента, у каждого
животного должен быть выстрижен участок кожи в области плеч и спины. Поскольку проницаемость
поврежденной и неповрежденной кожи различна, необходимо избегать повреждений кожи. После
того, как выстрижен участок кожи, приблизительно за 24 ч до нанесения исследуемого вещества,
поверхность кожи должна быть обработана ацетоном для удаления кожного жира. Дополнительное
мытье мылом и водой не рекомендуется, поскольку любые мыльные остатки могут стимулировать
абсорбцию вещества. Область кожи должна быть достаточной для достоверного вычисления
поглощенного количества исследуемого вещества на 1 см2кожи, предпочтительно, как минимум. 10
см2. Данная площадь используется для крыс массой 200-250 г. После обработки животных
возвращают в клетки.
4.1.4Подготовка исследуемого вещества
Проба исследуемого вещества (например, чистый, разбавленный или смешанный препарат,
содержащий исследуемое вещество, который будет наноситься на кожу) должна быть такой же. какой
человек или другие потенциальные целевые виды могут подвергаться в реальных условиях
воздействия. Любые отклонения в составе исследуемой пробы должны быть обоснованы. При
необходимости исследуемое вещество растворяют или суспендируют в подходящем растворителе.
Для растворителей (в случае, если это не вода) должны быть известны абсорбционные
характеристики и возможность потенциального взаимодействия с исследуемым веществом.
4.1.5Нанесение исследуемого вещества
2