ГОСТ 32435-2013
4.2 Приемный раствор
Предпочтительно использовать физиологически проводящий приемный раствор, однако, могут
использоваться идругие растворы при условии, что их применение обосновано.
Необходимо знать точный состав приемного раствора.
Исследуемое вещество должно быть растворимо в приемном растворе таким образом, чтобы
это не мешало абсорбции.
Приемный раствор не должен оказывать влияния на целостность кожного образца.
В проточных системах скорость потока не должна мешать диффузии исследуемого вещества в
приемный раствор. В статических системах приемный раствор должен постоянно перемешиваться и
регулярно обновляться. При изучении метаболизма приемный раствор должен поддерживать
жизнеспособность кожи на протяжении всего эксперимента.
4.3 Подготовка кожи
В эксперименте может использоваться кожа человека или животных. Предпочтительно
использовать жизнеспособную кожу, нежизнеспособная кожа также может использоваться при
условии, что подтверждена ее целостность. Пригодными для применения являются, как
эпидермальные оболочки (разделенные обработкой энзимами, теплом или химическим способом),
так и расщепленные кожные образцы (обычно от 200 до 400 мкм толщиной), подготовленные с
помощью дерматома. Может использоваться кожа обычной толщины, но избыточной толщины кожи
(приблизительно > 1 мм) следует избегать, если только это не является специальным требованием
для определения вещества в слоях кожи.
Подбор видов, анатомическое место и техника препарирования должны быть обоснованы.
Необходимо получение достоверных данных, как минимум, четырех воспроизведений для каждой
экспериментальной пробы.
4.4 Целостность кожного образца
Результатом неправильной подготовки может явиться повреждение роговой оболочки, поэтому
целостность подготовленной кожи должна быть проверена. При исследовании кожного метаболизма
свеже срезаннаякожа должнабытьиспользована,как можно быстреепри условиях,
поддерживающих метаболическую активность. Свеже срезанная кожа должна быть использована в
течение 24 часов, но приемлемый период хранения кожи может изменяться в зависимости от
системы энзимов, вовлеченных в метаболизм, и температур хранения. Когда пробы кожи хранятся до
использования, необходимо убедиться, что поддерживается барьерная функция.
4.5 Подготовка исследуемого вещества
Проба исследуемого вещества (например, чистый, разбавленный или смешанный материал,
содержащий исследуемое вещество, который наносится на кожу) должна быть подготовлена в той же
форме (или в форме соответствующего суррогата), в которой человек или другие потенциальные
целевые виды могут подвергаться ев воздействию. Любые другие формы используемой пробы
должны быть обоснованы.
4.6 Состав и концентрации исследуемого вещества
Обычно используется более одной концентрации исследуемого вещества в диапазоне реальных
воздействий на человека. Также должен быть рассмотрен экспериментальный диапазон типичных
составов.
4.7 Нанесение вещества на кожу
Нанесение вещества, имитирующее воздействие на человека, составляет от 1 до 5 мг/см2 кожи
для твердых веществ и до 10 мкл/см2 для жидкостей. Количество должно быть обосновано
ожидаемымиусловиямипроведенияиспытания,целямиисследованияифизическими
характеристиками пробы. Например, нанесения на кожу могут быть неопределенными, в случае, если
используются большие количества вещества на единицу поверхности.
4.8 Температура
На пассивную диффузию веществ (и. соответственно, на кожно резорбтивное действие) влияет
температура. Для диффузионной камеры и кожи должна поддерживаться постоянная температура,
близкая к нормальной температуре кожи (32±1)С. Различные конструкции ячеек требуют
применения различных водяных бань и нагреваемых температурных блоков для поддержания
физиологической нормы для кожи и приемного раствора. Влажность должна быть в пределе от 30 % до
70 %.
3