ГОСТ 16445-2012
5 Методы испытаний
5.1 Для определения внешнего вида, наличия посторонней примеси,хлопьев и осадка
ампулы с сывороткой встряхивают и просматривают в проходящем свете.
Содержимое ампул должно представлять собой прозрачную, слегка опалесцирующую
жидкость желтого цвета с розовым оттенком без хлопьев, осадка и посторонней примеси.
5.2 Определение массовой доли глицерина
5.2.1 Аппаратура, материалы и реактивы
Для проведения испытания применяют:
- пикнометр вместимостью 1—2 см3по ГОСТ 22524:
- баню водяную или термостат;
- термометр технический стеклянный ртутный со шкалой от О °С до100 °С и ценой деления
1°С по ГОСТ 28498;
- весы лабораторные аналитические;
- эксикатор по ГОСТ 25336;
- пипетки градуированные для отбора жидкости по ГОСТ 29227;
- воду дистиллированную по ГОСТ 6709. кипяченую или бидистиллированную.
5.2.2 Подготовка к испытанию
Пикнометр тщательно очищают хромовой смесью, промывают водой, ополаскивают спиртом,
затем эфиром, высушивают продуванием воздуха или в сушильном шкафу и охлаждают в эксикаторе.
5.2.3 Проведение испытания
Пикнометр взвешивают на аналитических весах с погрешностью не более 0,0002 г. Наполняют
его дистиллированной водой до метки, выдерживают на водяной бане или в термостате при
температуре 20 еС в течение 20—30 мин и вновь корректируют заполнение водой до метки.
Затем пикнометр обтирают и взвешивают на аналитических весах. Освобождают пикнометр от воды,
сушат, как указано выше, и заполняют испытуемой гемолитической сывороткой. Дальнейшие
процедуры проводят так же. как при определении массы воды.
5.2.4 Обработка результатов
Плотность гемолитической сыворотки d. содержащей глицерин, r/см3. вычисляют по формуле
d = — ,(1)
т,
где т — масса пробы сыворотки в объеме пикнометра, г,
mi — масса пробы воды в объеме пикнометра, г.
За окончательный результат испытания принимают среднеарифметическое результатов трех
параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать
0.0008 г/см3.
Плотность гемолитической сыворотки d должна составлять 1.115—1.145 г/см3, что соответ
ствует 45 % — 55 % массовой доли глицерина в сыворотке.
5.3 Определение стерильности
Стерильность сыворотки определяют по ГОСТ 28085.
Сыворотка должна быть стерильной.
5.4 Определение активности (титра) и гемолитических свойств
Активность гемолитической сыворотки определяют по показателю100 %-ного гемолиза
эритроцитов барана в гемолитической системе. Титрование гемолитической сыворотки производится
комплементом для реакции связывания комплемента ГОСТ 16446с титром 0,08 — 0,14 в
гемолитической системе.
Титром гемолитической сыворотки следует считать наибольшее ее разведение (наименьшее
количество), при котором в течение 10 мин при температуре 37 5С - 38 °С наступает полный (100 %-
ный) гемолиз 0.2 см3 2.5 %-ной взвеси эритроцитов барана в присутствии 0,2 см3 комплемента в
разведении 1:20 в общем объеме жидкости 1,0 см3.
Сыворотка должна характеризоваться полным отсутствием гемолиза эритроцитов барана в
пробирке без комплемента.
5.4.1 Оборудование и реактивы
Для проведения испытания применяют:
- штативы;
- пробирки стеклянные по ГОСТ 25336;
- стаканы лабораторные, колбы по ГОСТ 25336;
- колбы мерные вместимостью 100. 500 и 1000 см3по ГОСТ 1770;
- пипетки вместимостью до 10 см3 с ценой деления 0.1 см3по ГОСТ 29227;
4