ГОСТ 32367-2013
4.3.3Для получения основного раствора, который можно точно дозировать в воду, используют
растворители. При применении рекомендуемой концентрации растворителя в окончательной тесто
вой среде (то есть s 0,1 мг/л) упомянутые выше растворители не будут ядовиты и не будут увеличи
вать водную растворимость вещества.
4.3.4Диспергаторы могут помочь в точном дозировании и дисперсии. При рекомендуемой
концентрации в конечной испытательной среде (S 0,1 мл/л) упомянутые выше диспергаторы не будут
ядовиты и не будут увеличивать водную растворимость вещества.
5 Процедура эксперимента
5.1 Условия экспозиции
5.1.1 Продолжительность
Продолжительность теста - 21 день.
5.1.2 Отсадка
5.1.2.1 Родительских животных отсаживают индивидуально по одному в экспериментальные ем
кости объемом 50 - 100 мл среды каждый.
5.1.2.2 Иногда для соответствия требованиям аналитической процедуры, используемой для оп
ределения концентрации тестируемого вещества, требуются большие объемы. Если используют
объемы больше чем 100 мл. необходимо увеличить рацион питания Daphnia. чтобы гарантировать
доступность пищи в соответствии с критериями применимости. Для динамического (проточного) теста
могут быть использованы другие технические процедуры тестирования (например, отсадка четырех
групп по 10 животных в большом аквариуме), но любые изменения в тесте должны быть отмечены.
5.1.3 Тестируемые животные
5.1.3.1. Для полустатических тестов используют по крайней мере 10 животных, содержащихся
индивидуально при каждой тестируемой концентрации, и. как минимум. 10 животных индивидуально
отсаживают для контроля.
5.1.3.2 Для динамических (проточных) тестов более подходящим является использование 40
животных, разделенных на четыре группы по 10 животных в каждой тестируемой концентрации [1].
Можно использовать и меньшее число подопытных животных, но рекомендуется использовать не ме нее
20 животных для каждой концентрации, разделенных по меньшей мере на две или более групп с равным
числом животных (например, четыре емкости с пятью Daphnia). Для тестов, где животные со держатся
в группах, не представляется возможным определить репродуктивную способность как об щее число
выжившего потомства, произведенного материнскими особями в конце теста, если мате ринские особи
погибают. В этих случаях репродуктивная способность должна быть выражена как об щее количество
выжившего потомства, произведенного родительскими особями с начала теста.
5.1.3.3 Отсадка в тестовые сосуды должна происходить случайным образом, так же как и вся
последующая обработка. В противном случае это может привести к неточным результатам, которые
могут быть восприняты как влияние концентрации. В частности, если экспериментальные емкости
обрабатываются при отсадке или изменении концентрации, то некоторые связанные со временем
эффекты, такие, как усталость оператора или другие ошибки, могут иметь большое влияние при бо лее
высоких концентрациях. Кроме того, если результаты испытаний затронут начальные условия или
условия окружающей среды теста, такие, как условия в лаборатории, это может привести к оста новке
теста.
5.1.4 Кормление
5.1.4.1 Для полустатических тестов кормить животных желательно ежедневно, по крайней мере
три раза в неделю (то есть в соответствии с обновлением среды). О любых отклонениях от этого пра
вила (например, для динамического теста) необходимо делать отметку в отчете.
5.1.4.2 Во время теста рацион питания материнских особей должен состоять из живых одно
клеточных водорослей (одной или более) нижеследующих видов: Chlorellasp. Selenastmm
capricornutum (синоним Pscudokirchnehella subcapitata] [15] и Scenedesmus subspicatus. Питание
должно быть основано на количестве органического углерода (С), предоставляемого каждой роди
тельской особи. Для Daphnia тадпа [16] размер порции, находящийся между 0,1 и 0.2 мг CIDaphnia
/день, достаточен для получения необходимого количества потомства, отвечающего критериям при
менимости. Корм следует подавать или равными порциями в течение всего теста, или. что более же
лательно, меньшими порциями в начале эксперимента, затем увеличивая порцию во время теста,
принимая во внимание рост материнских особей. В этом случае рацион все время должен оставаться в
пределах рекомендуемого диапазона 0,1 - 0.2 мг C/Dap/w/a/день.
5.1.4.3 Если для расчета количества необходимого углерода в рационе используют косвенные
методы, такие, как количество клеток водорослей или степень поглощения света (что имеет смысл из
соображений удобства, так как измерение концентрации углерода является трудоемким), каждая ла-
4