ГОСТ 32367-2013
следует проводить по крайней мере три раза в неделю. Если по результатам предварительных тес тов
на стабильность (см. 3.2.2) тестируемое вещество в используемых концентрациях неустойчиво (то
есть вне диапазона 80 % - 120 % номинальной концентрации или падает ниже 80 % начальной
концентрации) за максимальный период обновления среды (то есть три дня), обновление необходимо
проводить чаще или использовать проточный тест.
5.1.10.2 Если обновление среды проводят в полустатических тестах, готовят вторую серию тес
товых емкостей и родительские особи пересаживают туда с помощью, например, стеклянной пипетки
подходящего диаметра. Объем среды, переданной с Daphnia. должен быть минимизирован.
5.2Наблюдения
Результаты наблюдений, сделанных во время теста, следует регистрировать по соответствую
щей форме (см. примеры в приложениях С и D). Если необходимы другие измерения (см. 3.1.2 и 5.5),
могут потребоваться дополнительные наблюдения.
5.3 Потомство
Потомство, произведенное каждой родительской особью, следует удалять и подсчитывать еже
дневно от момента появления первого помета, чтобы предотвратить потребление ими пищи, предна
значенной для взрослых. Для целей настоящего стандарта подсчитывают только число выживших
животных в помете, но также регистрируют присутствие несозревших яиц или мертвого потомства.
5.4 Смертность
Смертность среди родительских особей следует регистрировать, желательно ежедневно, в то
же самое время, что и подсчет потомства.
5.5 Другие параметры
Хотя настоящий стандарт разработан преимущественно для оценки воздействия вещества на
воспроизводство, можно также количественно определить и другие эффекты, которые позволяют
провести статистический анализ. Нужными данными являются изменения роста, так как они дают ин
формацию о возможных сублетальных эффектах, которые могут быть более полезными, чем одни
только данные по воспроизводству. Рекомендуется проведение измерения длины родительских осо
бей (длина тела без анальных члеников в конце теста). Другие параметры также могут быть измере ны
или вычислены. Они включают время появления первого помета (и последующих), число и размер
пометов на особь, число нежизнеспособного потомства, наличие в помете самцов или эфиппий и,
возможно, величину увеличения популяции (см. п.2 и процедуру определения пола в приложении F).
5.6 Частота количественных анализов и измерений
5.6.1 Концентрация кислорода, температура, жесткость и pH следует измерять по крайней мере
один раз в неделю, в новых и старых средах, в контроле(ях) и при самой высокой тестируемой кон
центрации вещества.
5.6.2 Во время теста концентрации тестируемого вещества определяют через равномерные ин
тервалы.
5.6.3 В полустатических тестах, где концентрацию тестируемого вещества считают остающейся
в пределах ± 20 % номинальной (то есть в пределах диапазона 80 % - 120 % - см. 3.2 и 5.1.10.1), ре
комендуется проводить измерение содержания вещества, как минимум, в самой высокой и самой
низкой тестируемых концентрациях перед обновлением среды (анализ следует проводить сразу по
сле приготовления раствора).
5.6.4 В тех тестах, где, как ожидают, концентрация вещества не будет оставаться в пределах ±
20 % номинального значения, необходимо провести определение всех концентраций, если образец
свежий или его обновили. В тех ситуациях, когда установленная первоначальная концентрация опыт
ного вещества не находится в пределах ± 20 % от номинального значения, но существуют весомые
доказательства, подтверждающие повторяемость и стабильность первоначальных концентраций (то
есть концентрация опытного вещества составляет 80-120 % первоначальной концентрации), хими
ческие определения наивысших и наименьших уровней концентраций могут не проводиться во вто
рую и третью неделю опыта. Во всех случаях определение концентраций образца до его обновления
следует выполнять только с использованием повторов в сосуде для каждой концентрации.
5.6.5 Если выполняют динамический (проточный) тест, рекомендуется использовать выборку,
описанную для полустатического теста (но анализ старых растворов здесь не применяют). Однако
было бы желательно увеличить количество отобранных образцов в течение первой недели (напри
мер. серии измерений) для проверки стабильности тестовых концентраций. В этих типах тестов по
ступление разбавителя и тестируемого вещества необходимо проверять ежедневно.
5.6.6 Если есть свидетельства того, что концентрация тестируемого вещества поддерживалась
6