ГОСТ ISO 22119-2013
Количественныйанализопределяетфлуоресценцию,соответствующуюколичеству
нуклеиновых кислот целевой последовательности, сгенерированную в течение фазы амплификации
ПЦР. Это может быть использовано для определения начального количества целевых нуклеиновых
кислот в образце-мишени.
Целевые нуклеиновые кислоты количественно учитываются со ссылкой на стандартную кривую.
Другие методы могут быть применены, если была продемонстрирована их точность.
9.4.3.2 Метод стандартной кривой для количественного учета
Любая стабильная и чистая РНК или ДНК с известной концентрацией может быть использована
дляподготовкистандартнойкривой дляпоследовательного разведения.Эффективность
амплификации стандартной кривой и целевой нуклеиновой кислоты должны находиться в строгом
соответствии. Плазмидная ДНК и транскрибируемая in vitro РНК, как правило, используются для
подготовки стандартов.
Целевая концентрация должна попадать в диапазон калибровочной кривой.
Должно быть применено соответствующее число точек калибровки и повторов, охватывающих
диапазон количественного учета [например, по крайней мере четыре калибровочные точки с двумя
повторами (в общей сложность 4 на 2 значения) или шесть калибровочных точек с одним значением в
каждой точке (всего 6 точек)].
10 Оценка и документация
Оценка возможна при условии, что результаты, полученные с контрольной группой, указанной в
9.3, однозначны. Возможные результаты ПЦР приведены в ISO 22174, таблица 2.
8