ГОСТ ISO 22119-2013; Страница 11

или поделиться

Ещё ГОСТы из 41757, используйте поиск в верху страницы

ГОСТ 32529-2013 Стекло и изделия из него. Правила приемки (Настоящий стандарт устанавливает правила проверки соответствия листового стекла и изделий из него (далее - продукция) требованиям нормативных документов при приемке, входном контроле и независимом контроле третьей стороной) ГОСТ ISO 20837-2013 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для обнаружения патогенных микроорганизмов в пищевых продуктах. Требования к подготовке образцов для качественного обнаружения (В настоящем стандарте приводятся критерии и примеры подготовки образцов для получения ПЦР-совместимых образцов или нуклеиновых кислот, качество и количество которых достаточны для использования в ПЦР. В стандарте описаны общие принципы процесса подготовки образцов. Ссылки на стандарты, в которых описано обогащение микроорганизмами, приведены в приложении A, а подробное изложение метода выделения ДНК приведено в приложении B. Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты, а также в случае необходимости при некоторой адаптации применим к кормам и к пробам окружающей среды) ГОСТ 32467-2013 Карбамид (мочевина). Определение содержания азота. Титриметрический метод после дистилляции (Настоящий стандарт устанавливает порядок определения содержания азота в мочевине (карбамиде) титриметрическим методом после дистилляции, также известным как метод Кьельдаля, в диапазоне от 46 % до 47 %)

Страница 11

Страница 1

Untitled document

ГОСТ ISO 22119-2013

праймерами и молекулярными маяками отжига и шагом элонгации. Флуоресцентный сигнал

контролируется во время отжига.

9.3 Оценка результатов

Оценка результатов испытания - по ISO 22174.

ПЦР в реальном времени позволяет одновременно определить и разделить сигналы

специфических патогенов и внутреннего контроля амплификации. Следовательно, рекомендуется

использовать внутренний контроль амплификации.

9.4 Анализ данных флуоресценции

9.4.1 Участок амплификации

9.4.1.1 Общие положения

В процессе амплификации количество обнаруживаемых ПЦРпродуктов увеличивается.

Увеличение флуоресцентного сигнала связано с увеличением количества ПЦР-продуктов. Это может

быть графически изображено на кривой амплификации (см. рисунок 4).

Типичная кривая амплификации состоит из трех этапов, характеризующих процесс ПЦР.

Обозначение

N - число амплифицированных молекул.

v - число циклов амплификации.

/ - экспоненциальная фаза.

2 - линейная фаза.

3 - фаза плато.

Рисунок 4 - Кривая амплификации

9.4.1.2 Фаза 1: Экспоненциальная фаза

Экспоненциальная фаза представляет собой цикл диапазона высокой точности, который

характеризуется высокой и постоянной эффективностью амплификации. Во время экспоненциальной

фазы отношение ПЦР-продукта может быть описано уравнением (1):

Ne= N (1 + if)(1)

где К; - число амплифицированных молекул;

N - начальное число целевых молекул;

- эффективность системы;

v- число циклов амплификации.

9.4.1.3 Фаза 2: Линейная фаза

Линейная фаза характеризуется выравниванием эффекта, когда наклон кривой амплификации

постоянно уменьшается. В этот момент один или несколько компонентов падают ниже критической

концентрации и эффективность амплификации начинает уменьшаться. Фаза называется линейной,

так как амплификация приближается к арифметической прогрессии в большей степени, чем к

геометрической.

9.4.1.4 Фаза 3: Фаза плато

На плато амплификация ПЦР останавливается, и сигнал остается относительно постоянным [4].

9.4.2 Оценка данных флуоресценции

Положительные образцы генерируют возникновение участка амплификации, по крайней мере,

первой фазы типичной кривой амплификации. Кривая амплификации этих образцов пересекает

пороговое значение после определенного числа циклов. Образцы с флуоресцентным сигналом выше

порогового считаются положительными.

9.4.3 Количественный анализ

9.4.3.1 Общие положения