ГОСТ Р 55448—2013
Пипеткой отбирают 1 см3 стандартного образца состава раствора охратоксина А в
ацетонитриле массовой концентрации 50 мкг/см3. помещают в мерную колбу вместимостью 50 см3и
доводят объем до метки ацетонитрилом.
Срок хранения приготовленного раствора - не более б мес.
7.4.5.3 Приготовление раствора охратоксина А в ацетонитриле номинального значения
массовой концентрации 100 нг/см3
В мерную колбу вместимостью 50 см3помещают 5 см3раствора охратоксина А номинального
значения массовой концентрации 1 мкг/см3по 7.4.5.2. что соответствует 1000 нг/см3, и доводят объем до
метки ацетонитрилом.
Срок хранения полученного раствора - не более 3 мес.
7.4.5.4 Приготовление градуировочных растворов охратоксина А в подвижной фазе
Для приготовления градуировочных растворов охратоксина А номинальных значений массовой
концентрации 100. 40 и 10 нг/см3берут мерные колбы вместимостью 50. 25 и 50 см3соответственно и
помещают в них по 5.0; 1.0 и 0,5 см3исходного раствора охратоксина А в ацетонитриле (см. 7.4.5.2).
Объем в колбе доводят до метки подвижной фазой (см. 7.4.2).
Срок хранения градуировочных растворов - не более одной недели.
7.4.5.5 Приготовление проверочного раствора охратоксина А в подвижной фазе номинального
значения массовой концентрации 20 нг/см3
В мерную колбу вместимостью 25 см3помещают 0.5 см3 исходного раствора охратоксина А (см.
7.4 5.2) и доводят объем до метки подвижной фазой (см. 7.4.2).
П р и м е ч а н и е
-
При необходимостидопускается приготовление аналогичным способом растворов
охратоксина А другой массовой концентрации в диапазоне линейности градуировочной зависигмсти (см. 7.6).
7.5Подготовка хроматографа к работе
Подготовку хроматографа к работе проводят в соответствии с руководством по эксплуатации
жидкостного хроматографа и/или флуориметрического (спектрофлуориметрического) детектора.
Устанавливают рабочие длины волн возбуждения и регистрации (см. 5.2) и скорость подачи
подвижной фазы в зависимости от типоразмеров колонки, руководствуясь указаниями ее изготовителя,
например для колонки указанной в 5.2 рекомендуемая объемная скорость подвижной фазы составляет
200 мм3/мин. Рекомендуемый объем петли крана-дозатора 10 или 20 мм3. При наличии термостата
колонок устанавливают температуру 25 йС.
7.6 Градуировка хроматографа
В качестве образцов для градуировки хроматографа используют растворы охратоксина А в
подвижной фазе (см. 7.4.5.4).
Диапазон линейности градуировочной характеристики составляет от 10 до 100 нг/см3.
При соблюдении условий по 7.5 регистрируют не менее двух хроматограмм каждого раствора,
проверяют правильность автоматической разметки и. если необходимо, корректируют ее. удаляют
лишние пики.
Далее проводят процедуру градуировки согласно руководству пользователя программным
обеспечением и определяют время удерживания и параметры градуировочной характеристики для
охратоксина А.
Градуировку считают приемлемой, если вычисляемый программой коэффициент корреляции
не ниже 0.99. а относительное среднеквадратическое отклонение не превышает 5 %. Если хотя бы
одно из указанных условий не выполняется, регистрацию хроматограмм повторяют.
Внеочередную градуировку системы проводят при неудовлетворительных результатах
контроля ее стабильности (см. 7.7), а также при замене стандартного образца состава раствора
охратоксина А или изменении эффективности хроматографической системы, или чувствительности
детектора (например, после проведения ремонта или длительного простоя хроматографической
системы).
7.7 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят ежедневно перед началом
работы.
Массовую концентрацию охратоксина А для проведения контроля выбирают, исходя из
предполагаемого его содержания в анализируемых пробах (рекомендуется проверочный раствор
охратоксина А массовой концентрации 20 нг/см3).
Регистрируют не менее двух хроматограмм проверочного раствора (см. 7.4.5.5) и
идентифицируют пик охратоксина А. внося при необходимости программную коррекцию времени
удерживания.
5