ГОСТ Р 55576—2013
Приложение А
(справочное)
Требования к ПЦР-лаборатории
А.1 Лаборатория должна быть разделена на зоны (отдельные комнаты или помещения) для каждой из
стадий ПЦР-диагностиш.
А.2 Рабочая зона ПЦР-лаборатории в соответствии с этапами ПЦР-испытания должна включать следую
щий минимальный набор изолированных помещений:
- приема и регистрации лабораторной пробы;
- первичной обработки лабораторной пробы, подготовки анализируемой пробы (I зона, отдельный лами-
нар);
- выделения НК из анализируемой пробы (I зона, отдельный ламинар).
П р и м е ч а н и е - Помещения, где проводят работы по выделению и амплификации НК. располагают
как можно дальше от помещения для детекции и учета результатов ПЦР с целью исключения движения воздуш
ного потока и предотвращения контаминации продуктами амплификации (ампликонов). поскольку в процессе
ПЦР фрагменты ДНК накапливаются в огромных количествах и являются идеальными продуктами для реампли
фикации;
-приготовления реакционных смесей, постановки ПЦР (II зона);
-гибридизационно-флюоресцентной детекции и учета результатов испытания методом
Real Time PCR
(III
зона).
А.З Работа в ПЦР-лаборатории должна быть организована в одном направлении; от зон выделения и ам
плификации НК к зоне детекции и учета результатов ПЦР. В разных зонах лаборатории должны работать разные
сотрудники.
А.4 Не допускается выполнение ПЦР-испытаний в помещениях для проведения работ другими лабора
торными и генно-инженерными методами (клонирование, секвенирование. рестрикционный анализ).
Все работы по подготовке испытуемых проб и выделению НК проводят в ламинарном боксе II. Ill классов
защиты.
А.5 Каждая рабочая зона должна иметь свой набор лабораторной мебели, оборудования, реагентов, ав
томатических пипеток, расходных материалов, лабораторной посуды, защитной одежды, обуви, уборочного ин
вентаря и др. Имущество должно иметь маркировку, использование его в других помещениях или для проведе ния
других работ запрещено.
А.6 Для проведения ПЦР-ислытаний необходимо использовать только одноразовые микропробирки и на
конечники. Для предотвращения аэрозольного загрязнения автоматических пипеток используют наконечники с
антиаэроэольным фильтром. Пробирки и наконечники для автоматических пипеток используют однократно. При
переходе от одной пробы к другой обязательно меняют наконечники с целью предотвращения перекрестной кон
таминации в процессе выделения ДНК. РНК или при раскапывании реакционной смеси.
А.7 Работы по подготовке реакционной смеси для ПЦР. внесению выделенных НК в ПЦР-смесь проводят
в ПЦР-боксах. оснащенных ультрафиолетовыми лампами.
Регулярно следует проводить мониторинг помещений, оборудования, рабочих поверхностей, дверных ру
чек на наличие продуктов амплификации.
8