ГОСТ 31691—2012
Если оба эти условия выполняются, то среднее арифметическое значение выхода зеараленона
используют при расчетерезультатовопределенияпоформуле (10). Впротивном случаенаходятпричи
ны потерь зеараленона и повторяют определение его выхода.
7 Проведение испытаний
7.1 Экстракция зеараленона из пробы
Навеску измельченного продукта (см. раздел 5) массой 5 г помещают в плоскодонную колбувмес
тимостью 100 см3.Добавляют40 см3 хлороформа по 6.7 и перемешивают 30 мин на аппаратедля пере
мешивания. Пропускают полученный экстракт через бумажный складчатый фильтр «красная лента».
Отбирают20см3фильтрата. Если ванализируемой пробесодержание зеараленона ожидается науров
не 1,5 мг/кги более, отбирают 5см3фильтрата.
7.2 Очистка экстракта
Отобранный согласно 7.1 фильтрат переносят в делительную воронку, добавляют к нему 40 см3
раствора гидроксида натрия массовой концентрации 40 мг/дм3(6.2.2) и встряхивают в течение 2 мин.
Отбрасывают нижний хлороформный слой, отмеряют при помощи мерного цилиндра 30 см3верхнего
слоя, содержащего зеараленон, идобавляют к нему растворортофосфорной кислоты (6.2.3) до pH рас
твора от 7до 8 (расходуется приблизительно 30см3 раствора). pH раствора контролируют при помощи
индикаторной бумаги или рН-метра.
При образованиив пробестойкойэмульсиипри экстракциирекомендуетсяупаривание начального
фильтрата (20 см3) до меньшего объема (5 см3) передэкстракциейили центрифугированиесмеси после
экстракции в течение 1мин при частоте вращения от 3000до 4000 мин-1.
Нейтрализованный раствор переносят вделительную воронкуи проводят экстракцию зеаралено
на в хлороформ 2 раза порциями по 20 см3в течение 1минуты каждая. Собирают хлороформные экс
тракты в колбу для упаривания, пропуская их через фильтр «красная лента», заполненный 5 г
осушителя — безводногосернокислого натрия, предварительно промытого 5 см3хлороформа.
После пропускания экстрактов безводный сернокислый натрий на фильтре промывают 5 см3хло
роформа. присоединяя его к профильтрованному экстракту.
Выпаривают раствор досуха в токе азота или при разрежении от 2.5 до 10 кПа при температуре
водянойбаниот40 X до45 X , сухой остаток растворяют в0.5 см3 подвижной фазы (6.2.1), выдержива ют
не менее 10 мин и полученный концентрат пробы используютдля хроматографического анализа по 7.3
в течение рабочегодня.
7.3 Проведение хроматографических измерений
Регистрируют не менеедвух хроматограмм концентрата пробы, полученного по 7.2. Идентифици
руют пик зеараленона по совпадению времени удерживания зеараленона в концентрате пробы со вре
менем удерживания, полученном при контроле стабильности градуировочной характеристики.
Если зеараленон в концентрате пробы обнаружен, то вычисляют его массовую концентрацию для
каждой хроматограммы, используя градуировочную характеристику по6.5.
Проверяют выполнение условия (4). Если условие (4) выполняется, то в качестве значения массо
вой концентрации зеараленона в концентрате пробы принимают среднее арифметическое полученных
значений. Если условие не выполняется, проводят повторную регистрацию хроматограмм после устра
нения причины нестабильности.
Если массоваяконцентрациязеараленонав конечномконцентрате Схпревышает5 мкг/см3,то кон
центрат необходимо разбавить подвижной фазой по 6.2.1. Коэффициент разбавления Овычисляют по
формуле:
Q
s —
О)
где V0— объем разбавленного концентрата пробы, см3:
Va — объем аликвотной порции исходного концентрата пробы, взятыйдля разбавления, см3.
При возникновении сомнений в правильности идентификации пика зеараленона рекомендуется
ввести добавку раствора зеараленона в подвижной фазе (6.3.2) к концентрату пробы. О правильности
идентификации судят по увеличению площади (высоты) предполагаемого пика зеараленона. Величина
добавки должна составлять от 50 % до 150 % от найденного значения массовой концентрации
зеараленона в концентрате пробы.
6