ГОСТ Р 55228—2012
следующие порции. Пробу отбирают в колбу вместимостью 500 см3в количестве не менее 250 см3. При
проведенииферментации в емкостях, содержащих менее 250 см3культуральной жидкости, для анализа
используют содержимое нескольких колб так, чтобы объем суммарной пробы был не менее 250 см3.
Культуральную жидкость в колбе инактивируют нагреванием до температуры 80 °С. после чего осво
бождают от мицелия и взвешенных частиц путем фильтрации. Измеряют ареометром плотность
фильтрата культуральной жидкости, используемого для анализа.
3.6Подготовка к анализу
3.6.1 Определение общей массовой концентрации органических кислот в пересчете на мо
ногидрат лимонной кислоты в фильтрате культуральной жидкости
Помещают 10 см3фильтрата культуральной жидкости в мерную колбу вместимостью 250 см3, до
водят дистиллированной водой до метки и перемешивают (раствор А). Затем 20 см3раствора А поме
щают в коническую колбу вместимостью 250 см3, добавляют (75 ± 5) см3дистиллированной воды и
титруют раствором гидроокиси натрия молярной концентрации с (NaOH) = 0.1 моль/дм3. приготовлен
ным по ГОСТ 25794.1, в присутствии фенолфталеина до появления розовой окраски, не исчезающей в
течение 20 с.
Если массовая концентрация органических кислот в фильтрате культуральной жидкости К, опре
деленная по формуле (1), ниже 80 г/дм3, для приготовления раствора А берут 25 см3 фильтрата культу
ральной жидкости, а не 10 см3.
Массовую концентрацию органических кислот в пересчете на моногидрат лимонной кислоты в фи
льтрате культуральной жидкости С. г/дм3, вычисляют по формуле
у, Ч =
р
_
0.007V1000 250 1750V
щ
Вычисления проводят до второго десятичного знака.
За окончательный результат определения принимают среднеарифметическое значение результатов
двух параллельных определений Сср, г/дм3,округленное до первого десятичного знака, если выполняются
условия приемлемости; абсолютное значение разности между результатами двух определений, получен
ными в условиях повторяемости при Р = 95 %, не превышает предела повторяемости г- 1.00 г/дм3.
Абсолютное значение разности между результатами двух определений, полученными в условиях
воспроизводимости при Р - 95 %. не превышает предела воспроизводимости R = 2.00 г/дм3.
Границы абсолютной погрешности определения массовой концентрации органических кислот в
пересчете на моногидрат лимонной кислоты в фильтрате культуральной жидкости при Р = 95 % состав
ляют i 1.5 г/дм3.
3.6.2 В зависимости от величины массовой концентрации органических кислот в фильтрате куль
туральной жидкости, определенной по формуле (1). для проведения анализа берут фильтрат культу
ральной жидкости в объеме от 20 до 50 см3 из расчета, что во взятой анализируемой пробе должно
содержаться не менее 1 г и не более 2 г лимонной и сопутствующих кислот.
3.6.3 Приготовление раствора хлористого кальция с массовой долой 11,1 %
В предварительно взвешенном стеклянном стакане вместимостью 100см3взвешивают хлористый
кальций массой (11,10 ± 0,01) и растворяют в 88,90 см3 дистиллированной воды.
Срок хранения раствора хлористого кальция в плотно закрытой таре при температуре от 15 °С до
25 °С — не более 1 мес.
3.6.4 Приготовление раствора аммиака массовой концентрации 125 г/см3
В мерную колбу (с пришлифованной пробкой) вместимостью 1000 см3вносят 500 см3аммиака
водного. Доводят объем раствора аммиака в колбедо метки дистиллированной водой, закрывают колбу
пробкой и тщательно перемешивают.
где 0.007 — масса моногидрата лимонной кислоты, соответствующая 1 см3гидроокиси натрия моляр
ной концентрации с (NaOH) = 0.1 моль/дмэ. г/см3;
V — объем раствора гидроокиси натрия, израсходованный на титрование, см3;
1000
—
коэффициент пересчета см3в дм3;
V .- объем раствора А, взятый на титрование, см3;
объем фильтрата культуральной жидкости, взятый на определение, см3;
250
разведение фильтрата культуральной жидкости по 3.5.
V ,
4