ГО СТ Р 50396.1— 2010
6.4.6 Приготовление и правила использования сухих культуральных сред промышленного произ
водства проводят по техническому документу.
6.4.7 Каждое опытное употребление культуральных сред должно давать гарантию их годности.
Контроль культуральных сред — по ГО СТ Р ИСО 11133-1, [4].
Сроки и условия хранения культуральных сред — по ГО СТ Р ИСО 11133-1, [4].
7 Проведение исследования
7.1 Из навески подготовленной пробы продукта (см. 6.1.1) готовят исходное и ряд 10-кратных
разведений (см. 6.1.2) до такой степени, чтобы можно было определить предполагаемое количество
мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в 1 г исследуемого продукта.
Для определения общего количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микро
организмов выбирают те разведения, при посеве которых на чашках вырастает не более 300 колоний.
7.2 Посевы проводят глубинным агаровым методом. Перед посевом чашки маркируют. На дне
чашки Петри маркером ставят номер исследуемого образца продукта, разведение и дату.
Высевают одновременно вдве чашки Петри (параллельные определения) по 1см3 соответствую
щих последовательных разведений. Пипетку с посевным материалом держат под углом 45 °. не каса
ясь концом пипетки дна чашки.
В каждую чашку Петри с посевным материалом не позднее чем через 15 мин добавляют
(18
1
2) см3одну из агаризованных расплавленных и охлажденных до температуры (45 ± 1) вС культу
ральных сред (см. 6.3). Чашки с посевами, залитыми культуральной средой, осторожно покачивают или
вращают для равномерного распределения посевного материала во всей культуральной среде.
Чашки Петри с посевами расставляют на горизонтальной поверхности до полного застывания
культуральной среды.
7.3 Для предотвращения роста микроорганизмов, образующих налеты на поверхности среды
(ползучий рост), в чашки Петри с посевным материалом наливают (13*2) см3выбранной культураль
ной среды, перемешивают и после застывания на нее наливают без перемешивания второй слой (5
12) см3 этой же разогретой и охлажденной до температуры (45 ± 1) °С культуральной среды.
7.4 После застывания среды чашки с посевами, перевернутые дном вверх, культивируют в тер
мостате при температуре (30 i 1) °С в течение (72 ♦3) ч. Допускается предварительный учет количес тва
выросших колоний через (48 *. 1) ч с последующим окончательным учетом еще через (24 1 1) ч. Чашки
Петри с посевами распределяют в термостате по ГО СТ Р ИСО 7218.
8 Обработка результатов исследований
8.1 Результаты исследований оценивают по каждой пробе отдельно.
8.2 Подсчет микроорганизмов
8.2.1 Для подсчета количества микроорганизмов учитывают все выросшие колонии. Подсчет
проводят невооруженным глазом или с помощью лупы по ГО СТ 25706 или специально предназначен
ного для подсчета колоний прибора по ГО СТ Р ИСО 7218.
Подсчет проводят в посевах того разведения, количество колоний в котором не более 300.
Для получения достоверных результатов при подсчете количества колоний необходимо, чтобы
хотя бы в одной чашке содержалось не менее 15 колоний.
8.2.2 Количество микроорганизмов
N
в 1 г продукта вычисляют как средневзвешенное значение
из подсчетов двух последовательных разведений по формуле
У(л, + 0,1л2 )<*
где 1C — сумма колоний, подсчитанных на всех чашках вдвух последовательных разведениях, из кото
рых хотя бы в одной из них содержалось не менее 15 колоний;
V —
объем посевного материала, внесенного в чашку, см3;
л, — число отобранных для подсчета чашек первого выбранного разведения;
п2
— число отобранных для подсчета чашек последующего разведения;
d —
коэффициент разбавления, соответствующий первому выбранному разведению.
3