С. 5 ГОСТ 29184-91
ПРИЛОЖЕНИЕ
Обязательное
ОПИСАНИЕ МЕТОДА НВЧ И РАЗЪЯСНЕНИЯ ПО ЕГО ПРИМЕНЕНИЮ
1
1. Hi навески продукта готовят исходное и ряд десятикратных разведений до такой степени, чтобы мож
но было определить предполагаемое НВЧ бактерии семейства Entcrobactcnaceac.
Высеваемые объемы продукта и его разведения выбирают следующим образом:
а) по 1 см’ из разведения 10“1 и последующих более высоких разведений, если необходимо определить
количество бактерий семейства Entcrobactcnaceac. превышающее 3 клетки в 1,0 г (см3) продукта;
б) по 10 см5 из разведения 10_| или I см3 неразведенного продукта и по 1 см3 из разведения 10’1 и
последующего более высокого разведения, если необходимо определить количество бактерий семейства
Enterobactcriaccac. превышающее 3 клетки в 10,0 г (см5) продукта;
в) по 10 и 1см3 неразведенного продукта и ряда ею разведений, сети необходимо определить количество
бактерий семейства Enterobactcriaccac. превышающее 3 клетки в ИХ) см3 продукта.
2. Разведения и неразведенный продукт высевают параллельно в три колбы (пробирки) с питательной
средой. Инокулум объемом 1 см-’ высевают в 10 ем3 среды нормальной концентрации, инокулумы объемом 10
см3 — в 10 см3 среды двойной концентрации.
3. Посевы инкубируют в условиях, указанных в настоящем стандарте.
4. НВЧ бактерий семейства Entcrobactcnaceac определяют, исходя из количества положительных проби
рок с посевами по таблице.
5. Для определения НВЧ выбирают три самых высоких последовательных разведения, в первом из кото
рых все три повторности положительные, а в последнем и в последующем, уже нс оцениваемом разведении,
все три повторности отрицательные (например: 3. 2, 0 или 3. 2, I, 0).
6. Если после разведения, в котором все три пробирки были отрицательными, одна из пробирок больше
го (то есть следующего за ним) разведения окажется положительной (например 3, 2, 0. I), то для определе
ния НВЧ учитывают три разведения, начиная с того, в котором количество положительных пробирок было
меньше трех (то есть 2. (1. I).
7. Если после наибольшею разведения с тремя положительными пробирками было посеяно лишь одно
разведение, в котором оказались положительными одна или две пробирки, то НВЧ бактерий семейства
Enterobactcriaccac записывают как «более чем», так как в последующих разведениях могли бы быть положи
тельные пробирки. Например, сети при посеве число положительных пробирок соответствовало 3, 3, I или 3. 3,
2. то согласно таблице НВЧ будет более 460 или более 1100.
S. Если ни в одном из разведений нс было трех положительных пробирок, то для определения НВЧ
учитывают три последовательных разведения (например 2, 2. 1.0 или 2, 1. 0, 0).
9. Если все пробирки посеянных разведений будут отрицательные, то есть 0. 0, 0, то НВЧ бактерий
семейства Enterobactcriaccac ниже числа, выявляемого посеянными разведениями (например «ниже чем 3 в
10,0 г»), и наоборот, если все пробирки посеянных разведений будут положительными, то ость 3, 3. 3, то НВЧ
будет выше его максимального -значения, определяемою посеянными разведениями (например «выше чем 1100 в
1,0 г*).
При необходимости определения конечного числа бактерий исследование повторяется.
10. Если три десятикратных разведения были более низкими или более высокими по сравнению с приве
денным в таблице, то НВЧ бактерий семейства Entcrobactcnaceac в продукте будет па столько разрядов ниже
или выше, на сколько разрядов посеянные разведения отличаются от табличных.
Например. Для комбинации чисел 3. 2, 1 НВЧ составляет 150 микроорганизмов в 1.0 г (см3) продукта
в случае, если посеяны по 1 ext5разведения 10-1. 10~2. 10_3. Если для посева использованы разведения Ю’2.
10“J. 10“4, го найденное НВЧ равно 150х 10 ~ 1500 микроорганизмов в 1,0 г (см3). Если для посева использова лись
10 и 1 ext5неразведенного продукта и 1 ext’ разведения 10“1, то НВЧ равно 150:100 —1.5 в 1.0 г (см3) или
15 микроорганизмов в 10 ext5продукта.
11. Из значений НВЧ учитывают те, которые отвечают наиболее вероятным комбинациям трехзначного
числа первой категории. Если НВЧ. соответствующее кох бинацпп трехзначного числа первой категории, нс
получено, то его определяют комбинациях!!! трехзначного числа, соответствующего второй категории.
Приведенные в таблице наиболее вероятные числа соответствуют случаям, когда в среды высевали по
1 ext5 из КГ1, КГ’, 10 5 разведений, то есть 0.1, 0,01, 0.001 г (ем5) продукта.
Категория I — наиболее часто встречаемые комбинации положительных пробирок, которые могут быть
получены в 95 % случаев.
Категория 2 — менее вероятные комбинации положительных пробирок, встречающиеся в 4 % случаев.
Категория 3 или 0 — неприемлемые комбинации положительных пробирок, вероятность получения
которых для нормальных продуктов равна нулю для категории 0 либо мало вероятна для категории 3. Комби
нации этих категорий xtotyr быть следствием ошибки опыта или присутствия в продукте бактериостатических
веществ.
94