ГОСТ Р 52415— 2005
4.2 Реактивы и материалы
АТФ-реагент для биолюминесцентного определения АТФ. чистый сухой, содержащий люциферзу
светляков. Д-люциферин. соль магния, компоненты буферной системы, стабилизаторы [6].
Вода деионизированная с электропроводимостью не более 0.1 мкСм. получаемая в соответствии
с инструкцией к установке по 4.1.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
АТФ сухой с содержанием основного вещества не менее 99 % [7].
BPN-реагент чистый сухой с массовой долей неионного детергента не более 5 %. содержащий
компоненты буферной системы и комплекс протеаз [8].
Промывочный раствор для подготовки образцов кАТФ-метрии. чистый, с массовой долей неион
ного детергента не более 1 % [9).
Диметилсульфоксид [10].
Кислота соляная по ГОСТ 3118. х.ч.
Аргон по ГОСТ 10157.
Фильтровальная бумага по ГОСТ 12026 или фильтровальный картон по ГОСТ 12290.
Бумага мешочная по ГОСТ 2228.
Спирт этиловый по ГОСТ Р 51652.
Допускается применение других средств измерений, вспомогательных устройств с метрологичес
кими и техническими характеристиками, а также реактивов и материалов по качеству не уступающим
приведенным выше.
4.3 Отбор проб
Отбор проб — по ГОСТ 9225 и ГОСТ 26809.
4.4 Подготовка к измерениям
4.4.1 Приготовление водного раствора с массовой долей соляной кислоты от 1 % до 2 %
В мерную колбу вместимостью 1дм3(см. 4.1) наливают от 100 до 200 см3дистиллированной воды
и доливают пипеткой (см. 4.1) 50 см3соляной кислоты (см. 4.2). Приливают дистиллированную воду до
метки.
4.4.2 Подготовка посуды, инструментов и материалов
Лабораторную посуду, инструменты и материалы (полоски фильтровальной бумаги или фильтро
вального картона размером 4 х 12 см. завернутые в бумагу (см. 4.2). стерилизуют в соответствии с
ГОСТ 26668 (пункт 1.2).
Колбу для отбора молока вместимостью 100 см3 (см. 4.1) кипятят в водном растворе соляной
кислоты по 4.4.1 в течение 15 мин и ополаскивают дистиллированной водой. Затем колбу стерилизуют
в сушильном шкафу при температуре (160 ± 5) ЭС в течение 2 ч с последующим охлаждением в эксика
торе (см. 4.1)либо в стерилизаторе при температуре (121 ±2) °С в течение (30 ± 1) мин с последующим
охлаждением в эксикаторе (см. 4.1).
4.4.3 Очистка диметилсульфоксида с помощью перегонки
Диметилсульфоксид перегоняют в потоке аргона при температуре (72.0 ± 0.2) °С и остаточном
давлении 15 мм рт. ст. Для шлифов перегонной установки (см. 4.1) использование смазки не допускает ся.
Перегнанный диметилсульфоксид хранят в стеклянной посуде без доступа света в течение 30 дней при
температуре не выше 4 °С.
4.4.4 Подготовка раствора АТФ-реагента
В упаковку с сухим АТФ-реагентом (см. 4.2) автоматической пипеткой, позволяющей дозировать
1см3, вносят деионизированную воду по 4.2 в объеме, указанном на этикетке упаковки, и осторожно
перемешивают покачиванием. Еслидля испытания используют несколькоупаковок с сухим АТФ-реаген
том. то их содержимое после добавления деионизированной воды объединяют в одну упаковку с помо
щью автоматической пипетки. Перед использованием раствор АТФ-реагента выдерживают от 15 до 30
мин. Полученный раствор используют в течение 6 ч.
4.4.5 Приготовление контрольного образца АТФ с молярной концентрацией (С,) —
110—11 моль/см3
Взвешивают (0,2755 ± 0,0001) г АТФ (см. 4.2). растворяют его деионизированной водой в мерной
колбе вместимостью 5 см3(молярная концентрация водного раствора АТФ — 0,1 моль/см3).
0.5 см3водного раствора АТФ вносят в мерную колбу вместимостью 5 см3и доводят объем рас
твора до метки диметилсульфоксидом по 4.4.3 (молярная концентрация полученного раствора АТФ в
диметилсульфоксиде — 1-10—2моль/см3). Данную процедуру повторяют еще девять раз. лоследова-
3