С. 3 ГОСТ 26968-86
агар микробиологический по ГОСТ 17206—%;
воду дистиллированную по ГОСТ 6709—72;
спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5%2—67*;
спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300—87;
сусло солодовое неохмеленное;
кислоту лимонную по ГОСГ 908—79. раствор с массовой долей 20 %\ готовят следующим обра
зом: 20 глимонной кислоты переносят в мерную колбу, доводят объем водой до 100см1, рапивают в
пробирки или колбы и стерилизуют при температуре (121 ± 1) “С в течение 20 мин;
пробоотборник или щуп из нержавеющей стали;
чашка нейзильберовая вместимостью 150 см3.
Допускается применение другой аппаратуры, лабораторной посуды с метрологическими и тех
ническими характеристиками не ниже установленных в настоящем стандарте.
(Измененная редакция, Изм. Ns 1).
3. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
3.1. Подготовка посуды и материалов
3.1.1. Посуду, предназначенную для микробиологического анализа, моют, а новую —допол
нительно кипятят в подкисленной воде (раствор соляной кислоты массовой долей 1—2 %) в течение
15 мин. затем ополаскивают дистиллированной водой и стерилизуют.
Посуду стерилизуют всушильном шкафу при температуре 170 "С втечение 2 ч или встерилиза
торе при температуре (121 • 2) ‘С в течение 30 мин с последующим подсушиванием.
Чашки Петри, пипетки стерилизуют завернутыми в бумагу или в металлических пеналах. Вко
нец пипетки предварительно вкладывают кусочек ваты. Резиновые пробки стерилизуют в
стерилизаторе, завернутыми в бумагу.
Стерильную посуду хранят в плотно закрывающихся шкафах.
3.1. 3.1.1. (Измененная редакция, Изм. № 1).
3.2. Приготовление питательных сред
3.2.1. Приготовление мясо-пептонного агара
К 1000см3мясо-пептонного бульона прибавляют 20 гагара, нагревают на водяной бане до рас
творения. фильтруют через вату, рапивают в колбы и стерилизуют при температуре (121 ± 1) *С в
течение 15 мин.
3.2.2. Приготовление солодового сусла-агара
1000 см5 иеохмеленногосолодового сусла, разбавленного питьевой водой до массовой доли су
хих веществ 8—10 %, фильтруют через вату, прибавляют 20 гагара, нагревают на водяной банедо рас
плавления агара, затем рапивают в стерильные колбочки и стерилизуют 15 мин при температуре
(1I5il) *С.
Среду охлаждают до (45—55) ’С и устанавтивают pH З.бд.0,I. добаатяя 2—3см’ растворалимонной
кислоты с массовой долей 20 %. Готовую среду хранят в холодильнике при температуре (4±1) *С не
более 7сут. Если по истечении 7сут среда остается стерильной, то допускается хранение ее втечение
1 мес.
3.3. Проведение серии десятикратных разведений
В нейзильберовой чашке, предварительно обработанной этиловым спиртом и обожженной над
спиртовкой, взвешивают 10г сахара, записывая результат взвешиваниядо второгодесятичного знака.
Навеску переносят в плоскодонную колбу с 90 см’ стерильной волы, взбалтывают до полного
растворения и получают первое (исходное) разведение.
Второе разведение готовят из одной части первого разведения и девяти частей стерильной волы
путем смешивания в стерильной колбе или пробирке.
Разведения готовят до такой степени, чтобы можно было определить предполагаемое количес
тво микроорганизмов в 1г сахара.
При приготовлении разведений растворы перемешивают стерильной пипеткой путем десяти
кратного насасывания и выдувания из нее содержимого.
Интервал между приготовлением навесок или их разбавлений и высевом в питательные среды
не должен превышать 30 мин.
(Измененная редакция, Изм. Ns 1).
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652—2000.
150