Стр. 6 ГОСТ 25582—83
воротками против инфекционного ларинготрахеита в этой же дозе.
Затем во все пробирки с испытуемыми и контрольными сыворот
ками добавляют одинаковое количество (0,5 см3) соответствую
щих 10-кратных разведений вирусного антигена. Антиген можно
разливать одной и той жепипеткой, если начать с самого боль
шого разведения. Пробирки встряхивают энергично и оставляют
при комнатной температуре в течение суток.
Каждым разведением инокулируют по 4—5эмбрионов (или 4—
5 пробирок культуры клеток) путем инокуляции на хориоаллан-
тоисной оболочке или в хориоаллантоисную полость в количестве
0,2 см3.
Эмбрионы инкубируютпри температуре 37°С на протяжении
суток, проводя овоскопию ежедневно не менее одного раза. По
гибшие в первые 24 ч эмбрионы отбрасывают, а остальные вскры
вают на 6 сут для выявления специфических изменений на по
верхности хориоаллантоисной оболочки.
В реакции нейтрализации используются неразведенные сы
воротки, так как могут возникнуть некоторые нежелательные раз
личия междунейтрализационнымииндексами одной и той же
сыворотки,использованной в разведенноми неразведенном со
стоянии. При недостаточном количестве сыворотки ее разводят
до необходимого минимума(1 :2, 1:3 и т. д.). В этом случае
полученный индекс нейтрализации умножают на соответствующий
фактор разведения (1:2, 1:3 и т. д.).
2.3.4. Обработка результатов
2.3.4.1. Эмбриональную инфекционную дозу 50% (или инфек
ционную дозу 50% в культурах тканей) вычисляют отдельно для
каждой сыворотки на основании полученных результатов реакции
нейтрализации.Индекснейтрализациипредставляет разность
между логарифмическими показателями титров вируса в присут
ствии нормальной (отрицательной) и иммунной (положительной)
сывороток, подсчитанную по Риду и Менчу. Найденное по табли
це антилогарифмов число будет являться индексом нейтрализа
ции.
2.3.4.2. Вирусный изолят, который нейтрализуется положитель
ной сывороткой против инфекционного ларинготрахеита с индек
сом выше 50, индентифицируют как вирус инфекционного ларинго
трахеита.
Сыворотку с индексомнейтрализации 10 или меньше в реак
ции нейтрализации с известным штаммом вируса инфекционного
ларинготрахеита считают отрицательной, сыворотку с индексом
11—49—сомнительной, с индексом 50 и выше —положительной.
2.4. Методф л у о р е с ц и р у ю щ и хантител
Сущность метода заключается в обнаружении вирусного анти
гена при помощи специфической иммунофлуоресцентной сыворот-
14