Стр. 2 ГОСТ 25582—83
2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Метод в ы д е л е н и я вируса
Сущность метода заключается в выделении возбудителя забо
левания на куриных эмбрионах или на культуре клеток.
2.1.1. Аппаратура и материалы
нагрева
3000—
Для проведения исследования применяют:
термостат или инкубатор вакуумный с температурой
37—38°С;
ступки фарфоровые;
центрифугулабораторнуюсчастотойвращения
5000 об/мин;
измельчитель ткани;
пробирки стеклянные по ГОСТ 25336—82;
флаконы;
термометр;
шприцы с иглами;
пенициллин;
стрептомицин;
эмбрионы куриные 9—12-суточного возраста;
культуру клеток почек куриных эмбрионов и цыплят;
гидролизат лактальбумина 0,5% в растворе Хенкса.
2.1.2. Подготовка к исследованию
Пробы патологического материала, взятые для выделения ви
руса, гомогенизируют в изотоническом буферном растворе в кон
центрации 1:5с помощьюизмельчителя тканиили в ступке с
кварцевым стеклом. Смесь центрифугируют с частотой вращения
1500—2000 об/минв течение 10—15 мин.Надосадочную жид
кость сливают, добавляют по 1000 ЕД пенициллина и стрептоми
цина на 1 см3 суспензии и выдерживаютв течение 3—12 ч пои
2—4°С.
2.1.3. Проведение исследования
При выделении вирусана куриныхэмбрионах для каждой
пробы используют по 10 куриных эмбрионов. Полученную после
обработки пробы суспензию инокулируют на хориоаллантоисную
оболочку или в хориоаллантоисную полость вколичестве 0,1—
0,2 см3. "Зараженные эмбрионы одновременно с контрольными ин
кубируют при температуре 37°С в течение 8 сут. Эмбрионы овос-
копируют не реже чем один раз в сутки. Эмбрионы, погибшие в
первые 24 ч, отбрасывают, а эмбрионы, погибшие позже, удаляют
и сохраняют в холодильнике при температуре 4°С. Оставшиеся
живые эмбрионы убивают на 6—8 сут после инокулирования ох
лаждением в течение 2—3 ч при 4°С.
10